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ilkitty

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】为什么我的BSA紫外扫描没有特征吸收峰 已有5人参与

我在做用紫外扫描鉴定半抗原是否与半抗原偶联成功，用50%乙醇做溶剂，溶解BSA、半抗原及偶联产物，扫描200-400nm波长范围，发现BSA没有吸收峰，是一条平滑向下延伸的曲线，i不知道是什么原因造成的，请教高手！
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1楼 2011-03-03 17:51:54
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ilkitty

新虫 (初入文坛)

急求高手回复

都没人回复哦，自己顶一下吧！
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2楼2011-03-04 15:47:28
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睢珂

银虫 (初入文坛)
用PBS作溶剂吧！
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静立如山，素心如玉，上善若水
3楼2011-04-25 14:58:45
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yuguanggui

至尊木虫 (知名作家)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+5): Good~ 2011-05-04 16:39:03
你检测的波长需要使用石英，首先检查一下是不是使用的石英比色皿；
观察一下BSA溶液是不是出现沉淀，50%的乙醇容易使蛋白变性，可以适当降低有机溶剂的浓度；
还有BSA浓度是不是太低。
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yu
4楼2011-05-04 15:20:52
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susandan

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我用的PBS做的溶剂，280下吸收峰很小，纳闷中……
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5楼2014-04-25 18:54:41
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可能是有什么其他的吸收基团或者试剂干扰了BSA的紫外吸收峰（与之发生了叠加），另一种情况：BSA因为共价连接了半抗原，导致了彼此聚合或者这得形态改变而使得原有的特征紫外吸收峰不改变或者掩盖。

要检测半抗原与连接蛋白质之间是否形成了共价键，最好的一个试验方法是用质谱检测。
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6楼2014-04-25 23:47:20
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