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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请问关于厌氧瓶或厌氧管的灭菌问题
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higher1983

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请问关于厌氧瓶或厌氧管的灭菌问题 已有9人参与

在做厌氧菌培养实验时，将培养基加入普通的厌氧瓶（就是有盖能密封的瓶子）或厌氧管，通氮气后灭菌时是否要完全拧紧瓶口？会不会在高压高温下把瓶子涨坏？但要是不拧紧的话有可能有空气进入，纠结啊。。。请做过这类实验的高人指教，谢谢！
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1楼 2011-02-23 13:58:24
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

看天

木虫 (知名作家)
★
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引用回帖:
Originally posted by higher1983 at 2011-02-23 05:58:24:
在做厌氧菌培养实验时，将培养基加入普通的厌氧瓶（就是有盖能密封的瓶子）或厌氧管，通氮气后灭菌时是否要完全拧紧瓶口？会不会在高压高温下把瓶子涨坏？但要是不拧紧的话有可能有空气进入，纠结啊。。。请做过这 ...

不能完全拧紧 否者很有可能爆炸掉 应该先灭菌 再通氮气驱除 然后密封
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戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。
3楼2011-02-23 15:37:43
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yuyitaoxulin

铜虫 (初入文坛)
★
看天(金币+1): 鼓励交流 2011-02-23 18:05:08
应该先灭菌，再用氮气置换吧，气体不流通，灭菌不会彻底的
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走自己的路，让别人无路可走
4楼2011-02-23 17:21:40
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

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看天(金币+2): 鼓励交流 2011-02-24 11:33:34
引用回帖:
Originally posted by higher1983 at 2011-02-23 13:58:24:
在做厌氧菌培养实验时，将培养基加入普通的厌氧瓶（就是有盖能密封的瓶子）或厌氧管，通氮气后灭菌时是否要完全拧紧瓶口？会不会在高压高温下把瓶子涨坏？但要是不拧紧的话有可能有空气进入，纠结啊。。。请做过这 ...

，医用血清瓶洗净，然后装入约1/5体积的液体培养基（这些操作都是在通氮气并且培养基通氮气煮沸除氧的情况下），丁基胶塞，然后外面铝封。如果没有铝封，可以用细铁丝固定。然后灭菌，这样是绝对不会炸开的。

经费较多的话可以买一个铝封器，几千块钱，很省事儿的。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
5楼2011-02-23 20:05:42
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higher1983

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 看天 at 2011-02-24 11:34:48:
我做过血清瓶  可能质量问题 炸了两个
同时我的装液量在1/3左右 1/5的装液量也太少了

那请问您当时是先灭菌还是先通氮气？
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12楼2011-02-24 11:39:54
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brightfuture01

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Originally posted by higher1983 at 2011-02-24 11:37:25:
也就是必须要密封了？
我一直在担心，如果先灭菌后通氮气，是不是就除氧不彻底？或者在灭菌时把培养基里的还原剂氧化掉了
请指教

先灭菌后除氮气的方法我们从来不用，因为培养基要通氮气煮沸30分钟左右才能将氧气除完。如果是培养严格厌氧菌的话，先灭菌后除氮气的方法培养不活大多数严格厌氧菌。

灭完菌再除氧的方法是没有办法彻底除氧的。
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14楼2011-02-24 12:30:06
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漂流瓶_@

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by higher1983 at 2011-02-24 11:37:25
也就是必须要密封了？
我一直在担心，如果先灭菌后通氮气，是不是就除氧不彻底？或者在灭菌时把培养基里的还原剂氧化掉了
请指教...

还原剂是和培养基单独灭菌吧，需要充气密封灭菌。培养基可以灭菌后再通氮气，
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20楼2014-04-13 12:39:18
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brightfuture01

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会，需要铝封
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2楼2011-02-23 15:36:11
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higher1983

新虫 (小有名气)
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Originally posted by brightfuture01 at 2011-02-23 20:05:42:
，医用血清瓶洗净，然后装入约1/5体积的液体培养基（这些操作都是在通氮气并且培养基通氮气煮沸除氧的情况下），丁基胶塞，然后外面铝封。如果没有铝封，可以用细铁丝固定。然后灭菌，这样是绝对不会炸开 ...

哦？请问这样做为什么不会炸？是瓶子不同吗？谢谢
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6楼2011-02-24 11:15:17
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brightfuture01

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silicare(金币+1): 谢谢参与 2011-02-24 11:48:48
引用回帖:
Originally posted by higher1983 at 2011-02-24 11:15:17:
哦？请问这样做为什么不会炸？是瓶子不同吗？谢谢

根本就不会炸啊，灭菌锅里面有水，瓶子里面也有水，在铝封或者铁丝的作用下。压力差不至于将瓶子撑爆。

不过要注意，培养基的体积最多只能是容器体积的 1/5.

瓶子就是医院输液的那种就OK。
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7楼2011-02-24 11:17:19
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看天

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silicare(金币+1): 谢谢分享 2011-02-24 11:49:09
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-02-24 11:17:19:
根本就不会炸啊，灭菌锅里面有水，瓶子里面也有水，在铝封或者铁丝的作用下。压力差不至于将瓶子撑爆。

不过要注意，培养基的体积最多只能是容器体积的 1/5.

瓶子就是医院输液的那种就OK。

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同时我的装液量在1/3左右 1/5的装液量也太少了
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8楼2011-02-24 11:34:48
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看天

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lstt09nk(金币+2): 鼓励交流 2011-02-24 12:38:08
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Originally posted by brightfuture01 at 2011-02-24 11:17:19:
根本就不会炸啊，灭菌锅里面有水，瓶子里面也有水，在铝封或者铁丝的作用下。压力差不至于将瓶子撑爆。

不过要注意，培养基的体积最多只能是容器体积的 1/5.

瓶子就是医院输液的那种就OK。

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9楼2011-02-24 11:35:16
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higher1983

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Originally posted by brightfuture01 at 2011-02-24 11:17:19:
根本就不会炸啊，灭菌锅里面有水，瓶子里面也有水，在铝封或者铁丝的作用下。压力差不至于将瓶子撑爆。

不过要注意，培养基的体积最多只能是容器体积的 1/5.

瓶子就是医院输液的那种就OK。

也就是必须要密封了？
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