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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】土壤DNA提取及PCR
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qyunpeng

铁杆木虫 (小有名气)
有道理！！！

[ Last edited by qyunpeng on 2011-3-18 at 17:48 ]
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11楼2011-03-18 17:41:24
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qyunpeng

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by chen4 at 2011-03-18 13:56:46:
对土壤做前处理动作，TENP洗涤离心，最后用PBS处理，然后再提取DNA即可。

呵呵！chen4 兄的建议很好，我们已经利用TENP和PBS对土壤进行了前处理，但跑电泳后发现，洗涤离心后的上清液也有条带，不知道这样洗涤处理是否会影响后续的实验结果？
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12楼2011-03-18 17:48:35
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duckula7708

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励交流~~~ 2011-03-26 17:41:54
土壤的环境比较复杂，提取的DNA肯定含有许多杂质，这些杂质（尤其是腐殖质）会抑制PCR。你可以用一般的DNA纯化试剂盒处理下，然后再调节DNA的浓度，应该就可以了。当然，如果有条件的话直接购买土壤DNA提取试剂盒（很好用，效率高，杂质去除高）。
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13楼2011-03-22 16:03:41
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qyunpeng

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by duckula7708 at 2011-03-22 16:03:41:
土壤的环境比较复杂，提取的DNA肯定含有许多杂质，这些杂质（尤其是腐殖质）会抑制PCR。你可以用一般的DNA纯化试剂盒处理下，然后再调节DNA的浓度，应该就可以了。当然，如果有条件的话直接购买土壤DNA提取试剂盒 ...

土壤确实复杂，腐殖质很麻烦，如果能用上试剂盒就最好不过了，但经费不允许啊。现在在提取前用TENP和PBS洗涤了，但不知这样是否会影响结果？
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14楼2011-03-22 17:04:55
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发仔gkf

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
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rainwander(金币+5): 鼓励新虫~可以与大家一起分享吗？ 2011-03-26 17:42:41
是土壤总DNA的提取码？我们实验室有一种很好的方法，以前一直用，是我们导师八个月的总结得到的
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那事我懂
15楼2011-03-25 11:17:56
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发仔gkf

木虫 (正式写手)
还有用试剂盒也蛮好的，国外的，试剂盒大约1500块，听说的
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那事我懂
16楼2011-03-25 11:19:22
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yabing0324

金虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 发仔gkf at 2011-03-25 11:17:56:
是土壤总DNA的提取码？我们实验室有一种很好的方法，以前一直用，是我们导师八个月的总结得到的

可不可以把这个宝贵经验与我们分享呢，谢谢啦！
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17楼2011-03-25 19:23:13
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qyunpeng

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 发仔gkf at 2011-03-25 11:17:56:
是土壤总DNA的提取码？我们实验室有一种很好的方法，以前一直用，是我们导师八个月的总结得到的

不知 发仔gkf 虫友是否方便分享下你们的方法？我想它对很多人都会很有帮助。
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18楼2011-03-25 23:42:35
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wolfebst

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
土壤有专门的试剂盒，但是比较贵
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19楼2011-03-27 13:35:38
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qyunpeng

铁杆木虫 (小有名气)
当然，如果经费允许，试剂盒确实是不错的选择。
发仔gkf 虫友分享了他们的实验方法，确实不错。http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3008669
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20楼2011-03-27 13:59:07
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