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xwsooo

银虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】如何设计在引物的5‘端加尾巴

背景:我的两条上游引物在同一位置上,共享一条公共引物,所以在一个PCR反应里电泳后无法区分开两条条带。

目的:拟在其中一条引物加上15-20bp左右序列,已达到PCR一次,电泳一次即可区分开条带


过程:我在NCBI上Nucleotide上选择噬菌体物种,搜索到一个序列号,然后和我的目的序列在blast上比对,结果说“No significant similarity found”。

询问:我这样搜索的步骤对吗?
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