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欲用荧光法(FRET)研究BSA与豆豉纤溶酶的相互作用,求合适的方案(20金币)
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小飞刀
木虫
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帖子: 204
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虫号: 820372
[交流]
欲用荧光法(FRET)研究BSA与豆豉纤溶酶的相互作用,求合适的方案(20金币)
本人欲研究BSA和豆豉纤溶酶的相互作用,主要是想求得两者在tris-HCL缓冲溶液中的结合常数、结合位点、作用距离等,不行的话求得结合常数也可以
开始欲用荧光猝灭法,但猝灭法多用于BSA与小分子作用,蛋白质之间的作用不太适用,而且最主要的原因是两者都含有色氨酸,激发时都有荧光而形成干扰。
部分文献报道可用荧光共振能量转移(FRET)测得两蛋白质间的作用距离,可选用的外源性荧光是荧光蛋白,有机染料,镧系染料。选用荧光蛋白的话还要用到质粒重装,细胞转染等分子生物学手段,本人是做药学的,对分子生物学这些技术不懂,老板也不可能允许这么做。那就剩下选用有机染料或是镧系染料了,这两者中有没有适合用于研究蛋白质相互作用的呢?
或者有没有其他适合的其他方法?
希望能说的具体一些,你看我也写了一大版!
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2011-01-24 11:14:52
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小飞刀
木虫
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虫号: 820372
引用回帖:
Originally posted by
lj718
at 2011-01-24 15:06:20:
友情帮顶吧,不过如果有这个方案,人家愿不愿意给您啊?
就算是纯学术交流吧,应该没有什么损失吧!
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3楼
2011-01-24 20:32:13
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lj718
铁杆木虫
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在线: 817小时
虫号: 273954
小飞刀(金币+5, 博学EPI+1): 第一次发帖,谢谢回复者 2011-01-24 20:33:28
友情帮顶吧,不过如果有这个方案,人家愿不愿意给您啊?
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2楼
2011-01-24 15:06:20
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