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dongs510

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】我想请教酶测定蛋白含量的问题 已有2人参与

我是新手 之前是学化学的
结果接到的课题是做固定化酶
我要检测固定化酶的固载量  也就是测定原酶的蛋白量和固定化后剩余的蛋白量

可是现在遇到比较烦恼的问题
一个就是我买的sigma的candida rugosa 的酶粉 它在PBS中的溶解率也就1mg/mL 这个浓度对我需要的浓度来说太低了 我需要大于10mg/mL的浓度

第二个就是我配置的50mL 1mg/mL的酶液用考马斯亮蓝法测出来的蛋白含量只有1.6mg 这样测出来的蛋白含量也太低了点吧

现在请教各位大侠 我真的不懂 也没有什么基础 请赐教
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danghaichun

金虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我觉得有的有的酶水溶性不好,我用的PPL也是这个问题,我也想请教一下,期待有人解释
3楼2011-01-14 10:19:06
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

★ ★ ★
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dhd997(金币+2):good 2011-01-14 10:08:13
考马斯亮蓝法测蛋白含量要先做标准曲线的。
既然是测定原酶的蛋白量和固定化后剩余的蛋白量,你考马斯亮蓝法测595nm吸收值变化不就知道固载率了吗。
2楼2011-01-14 09:12:41
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