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3257197木虫 (正式写手)
森林木虫
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痰标本的处理方法
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一 痰标本是否合格判断: 痰直接涂片光镜下检查,每低倍镜视野鳞状上皮细胞《10个,白细胞>25个;或鳞状上皮细胞:白细胞《1:2.5;认为是合格痰标本。 二 合格痰标本进一步处理: 1〉.挑取1.5ml合格痰标本,置于13ml刻度离心管中,加入4倍体积的0.1%二硫苏糖醇振荡混匀,37℃郛化15分钟,再加入等体积磷酸缓冲液混匀再孵化5分钟,2000r/分离心10分钟,吸取上清1.5ml保存于EP管中,-70℃保存待测。细胞沉淀层保留待测细胞及分类。 2〉.细胞总数计数 留取细胞沉淀悬浮液2ml用磷酸缓冲液稀释2倍混匀以调整细胞浓度10⒍/ml,吸10ul入血常规计数板中计数,低倍镜下计算4个大方格的细胞总数,计算总细胞数:4个大方格的细胞总数除以4乘以2乘以10再乘103,得n×104/ml细胞数。 3〉.涂片制作 取1滴细胞沉淀悬浮液于干净玻片中推片2张,95%酒精固定,然后瑞氏染色。染色步骤为,将已编码的涂片放于染色架上,依标本所占面积大小及涂片厚度,一般加4-8滴瑞氏染液,染液将标本完全盖住,固定时间1-2分钟。吸取等体积的磷酸缓冲液4-8滴加于涂片上,吸耳球轻轻充吹之使之混匀,染色时间10-20分钟。用自来水冲洗涂片上染液,要轻轻摇动涂片使染液沉渣浮起冲走。冲洗时间不可过长,以防脱色及涂片冲走。在空气中自然干燥。 4.观察细胞分类 观察两次不同涂片的视野中200个有核细胞,分别计数中性粒细胞,巨噬细胞,淋巴细胞,嗜酸粒细胞绝对值,计算总数,然后取每高倍值,分别计算其百分比。 |
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