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3257197木虫 (正式写手)
森林木虫
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痰标本的处理方法
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一 痰标本是否合格判断： 痰直接涂片光镜下检查，每低倍镜视野鳞状上皮细胞《10个，白细胞>25个；或鳞状上皮细胞：白细胞《1：2.5；认为是合格痰标本。 二 合格痰标本进一步处理: 1〉.挑取1.5ml合格痰标本，置于13ml刻度离心管中，加入4倍体积的0.1%二硫苏糖醇振荡混匀，37℃郛化15分钟，再加入等体积磷酸缓冲液混匀再孵化5分钟，2000r/分离心10分钟，吸取上清1.5ml保存于EP管中，-70℃保存待测。细胞沉淀层保留待测细胞及分类。 2〉.细胞总数计数 留取细胞沉淀悬浮液2ml用磷酸缓冲液稀释2倍混匀以调整细胞浓度10⒍/ml，吸10ul入血常规计数板中计数，低倍镜下计算4个大方格的细胞总数，计算总细胞数：4个大方格的细胞总数除以4乘以2乘以10再乘10３，得ｎ×１０４／ｍｌ细胞数。 ３〉．涂片制作 取１滴细胞沉淀悬浮液于干净玻片中推片２张，９５％酒精固定，然后瑞氏染色。染色步骤为，将已编码的涂片放于染色架上，依标本所占面积大小及涂片厚度，一般加４－８滴瑞氏染液，染液将标本完全盖住，固定时间１－２分钟。吸取等体积的磷酸缓冲液４－８滴加于涂片上，吸耳球轻轻充吹之使之混匀，染色时间１０－２０分钟。用自来水冲洗涂片上染液，要轻轻摇动涂片使染液沉渣浮起冲走。冲洗时间不可过长，以防脱色及涂片冲走。在空气中自然干燥。 ４．观察细胞分类 观察两次不同涂片的视野中２００个有核细胞，分别计数中性粒细胞，巨噬细胞，淋巴细胞，嗜酸粒细胞绝对值，计算总数，然后取每高倍值，分别计算其百分比。 |
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