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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】pcr条带问题
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鹏飞九万里

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by waiwaidou_1983 at 2011-01-11 20:13:26:
1 首先排除，负对照没有污染

恩，还在一步步分析原因，谢了。。。
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11楼2011-01-12 16:18:00
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funny8125

银虫 (小有名气)
★
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我的意思不是引物污染，而是很多引物在PRIMER上面显示的很好，OLIGO上面也不错，可是真正做PCR的时候，引物会优先扩增你基因组里面其他的片段的，很多引物好不好不能只看评分什么的，要真正扩初目的条带才行，我建议你把偏小的片段回收测序下，看下，这个到底是什么东西。
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人类一思考，上帝就发笑。
12楼2011-01-13 14:39:33
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leo0078968

银虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
Originally posted by 鹏飞九万里 at 2011-01-12 16:16:59:

重复了。。。还是这样。。。引物是刚合成的，不可能被污染的。。。谢了~~

那你对你的PCR条件优化，试试。。
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路漫漫其修远兮，吾将上下而求索！
13楼2011-01-13 17:10:46
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陶古斯

木虫 (著名写手)
★
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综上所述，觉得要不是基因组的问题，就是扩增了基因组的其他部分；12楼讲的很对，不妨试一下，祝好
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14楼2011-01-13 17:30:31
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