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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】western滴加显色液后荧光猝灭是怎么回事？
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hongxing616

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】western滴加显色液后荧光猝灭是怎么回事？

western显影的时候滴加显色液后荧光很亮，可是胶片还没盖上去呢荧光就灭了，再加显色液后荧光还是很亮，可还是猝灭。哪位高手分析一下？
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1楼 2011-01-08 10:27:30
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
dhd997(金币+3):good 2011-01-08 17:07:13
hongxing616(金币+1):二抗前几次用的都是1:5000，而且没出现猝灭的情况， 2011-01-08 21:55:33
二抗浓度太高
反应温度太高

我之前也遇到了同样的问题，特别是用碧云天的发光液
稀释了二抗就好了，要不然用牛X的发光液，我们实验室现在用millipore的超级好用，而且还不是很贵
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3楼2011-01-08 16:47:39
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zx1984

木虫 (正式写手)
★
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2011-01-08 16:03:03
hongxing616(金币+1):前几次做的用的二抗都是1：:5000，而且也没出现猝灭的情况。 2011-01-08 21:53:55
应该是底物与二抗的标记物反应发出荧光，你说的我不太明白什么意思，可能是二抗浓度太高，1：5000的量应该够了
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2楼2011-01-08 15:28:08
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freedomangel

木虫 (著名写手)
我也想知道这个问题，高手赶快现身啊，
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4楼2011-01-08 19:22:28
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hongxing616

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2011-01-08 16:47:39:
二抗浓度太高
反应温度太高

我之前也遇到了同样的问题，特别是用碧云天的发光液
稀释了二抗就好了，要不然用牛X的发光液，我们实验室现在用millipore的超级好用，而且还不是很贵

millipore价格怎么样呀，哪个公司代理的呀。
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5楼2011-01-08 21:57:20
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