【求助/交流】PCR阴性对照总有微弱条带！！！ - 分子生物 - 综合其他

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wangchunling

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Originally posted by 475502411 at 2011-05-04 21:01:13:
我今天做实验就发现溢空现象，我看楼主可能是同样的问题

溢空？

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21楼2011-05-05 08:25:47

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wangchunling

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Originally posted by 79875441 at 2011-05-04 22:21:12:
可能酶被污染了，加酶的时候我为了不让移液枪碰到酶的管壁，我都拿两个枪头套在一起用

两个枪头？

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22楼2011-05-05 08:26:31

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475502411

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西瓜(金币+2): 最近特别活跃啊，有潜力 2011-05-05 22:02:53

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Originally posted by wangchunling at 2011-05-05 08:25:47:
溢空？

是啊，因为条带挺弱的，应该不是阳性扩增。你要不试一试单独跑一下阴性；或者是点样的时候，隔过几个孔什么都不点，再点阴性

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可以朝九晚五，也能浪迹天涯

23楼2011-05-05 10:46:38

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79875441

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Originally posted by wangchunling at 2011-05-05 08:26:31:
两个枪头？

对。两个枪头套在一起

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24楼2011-05-05 21:04:56

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wangchunling

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Originally posted by 475502411 at 2011-05-05 10:46:38:
是啊，因为条带挺弱的，应该不是阳性扩增。你要不试一试单独跑一下阴性；或者是点样的时候，隔过几个孔什么都不点，再点阴性

哦，明白啦！3Q

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25楼2011-05-06 17:17:03

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wangchunling

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Originally posted by 79875441 at 2011-05-05 21:04:56:
对。两个枪头套在一起

哦，还真没试过

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26楼2011-05-06 17:17:22

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yesucao

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建议把电泳缓冲液也换一下，也许点样的时候经常会有溢出情况，缓冲液有污染

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27楼2011-05-06 18:38:30

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你们实验室有没有做质粒？
有的话请考虑气溶胶。

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28楼2012-11-24 10:37:01

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pdream

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可以先只做几个阴性对照呀（不P标本），如果没有条带了，就是你的操作有问题；如果还有，那就可能PCR试剂有问题啦，实验环境中有污染也有可能。

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不忘初心，方得始终

29楼2012-11-27 14:58:58

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