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wangly

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助】UPLC检测对苯二酚

用WATERS公司的UPLC检测对苯二酚结果发现不保留,几个问题需要请教下大家:
    我选用的条件是:色谱柱:BEH C18 ,2.1×50mm,1.7um;
                    流动相:甲醇:1%乙酸水溶液=5:95
                                   流速:0.1ml/min;0.25ml/min
       国标选用的方法是常规的C18柱,4.6×250mm,5um
                                  流动相:甲醇:1%乙酸水溶液=5:95
                                  流速:0.8ml/min  保留时间基本控制在6~7min

      1.  0.25ml/min下的保留时间在0.5min;0.1ml/min下的保留时间约1.2min;以0.1ml/min会不会有点太低,影响检测的准确性;
   2.  如果继续增大乙酸在水溶液中的含量最大可以到多少?
   3.如果不换柱子还有什么还办法能够让保留时间延长?
   多谢!
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ss0128

新虫 (初入文坛)


wangly(金币+10):非常感谢! 2011-01-11 09:51:07
0.1的流速太慢了,UPLC的最佳流速在0.25~0.35之间,你用的是紫外检测器吧,注意下压力,不高的话可以用大点的流速,峰形会漂亮
可以适当提高甲醇的比例,摸条件时,可以先运行一个梯度方法,看看待测物质大致在哪个甲醇比例下出峰,再选用此比例的等度条件做,等度条件重现性好些
长柱子与短柱子在方法上是有一定区别的,
醋酸铵的浓度与柱子有关,具体能加到多少浓度也不好说,我用过的最高浓度是30mmol,你这个浓度貌似有点高,短柱子填料小,容易堵,10mmol就能够起到改善分离度和峰形的作用了
2楼2011-01-06 15:50:28
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