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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

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Originally posted by henkally at 2010-12-29 11:28:37:



这个问题,我觉得大家搞复杂了。
LZ是测蛋白含量,后续测酶活。没必要进行纯化,去除叶绿素。但叶绿素的吸收峰和BRADFORD(考染法)反应后产物的吸收峰接近,肯定会有影响。所以可以换个蛋白含量测试方法, ...

如何肯定叶绿素不会影响后续的酶活测定呢?
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
11楼2010-12-29 11:32:13
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kong10

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by henkally at 2010-12-29 11:28:37:



这个问题,我觉得大家搞复杂了。
LZ是测蛋白含量,后续测酶活。没必要进行纯化,去除叶绿素。但叶绿素的吸收峰和BRADFORD(考染法)反应后产物的吸收峰接近,肯定会有影响。所以可以换个蛋白含量测试方法, ...

BCA法测的准确度怎么样呢?对了,还想问问您,如果想去除样品里面的糖等物质,什么方法最可取?我也采用过硫酸铵沉淀,但是后面没看到沉淀,这个该怎么解释?灰常感谢
12楼2010-12-29 11:33:43
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henkally

禁虫 (著名写手)


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13楼2010-12-29 11:35:15
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kong10

新虫 (初入文坛)

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Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-29 11:31:05:



,这个柱子的填料是 葡聚糖凝胶G-25。原理是分子筛,一定是要过柱子的。离心啥用也没有。。。。。。

我明白,我的意思是加入葡聚糖的小柱子,再离心,这样做到底能不能去除糖和盐分?刚接触,多体谅,谢谢
14楼2010-12-29 11:36:39
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kong10

新虫 (初入文坛)

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Originally posted by henkally at 2010-12-29 11:35:15:


叶绿素性质很稳定的,基本没啥反应活性。
依据LZ描述的情况,肯定是植物样品,能测的酶活多半是CAT,SOD,POD,之类,本人做过,不会影响

我做的是蔗糖转化方面的酶,不知道有没有影响
15楼2010-12-29 11:37:50
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henkally

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16楼2010-12-29 11:38:50
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henkally

禁虫 (著名写手)

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17楼2010-12-29 11:42:37
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kong10

新虫 (初入文坛)

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Originally posted by henkally at 2010-12-29 11:42:37:



这个酶没做过,你自己试试吧。估计影响不大,不然你提取过程中,叶绿素如果能和它反应的话早反应了。

加你好友了,可以保持联系吗?非常感谢
18楼2010-12-29 11:45:06
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ws19861025

木虫 (著名写手)


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Originally posted by brightfuture01 at 2010-12-29 11:31:05:



,这个柱子的填料是 葡聚糖凝胶G-25。原理是分子筛,一定是要过柱子的。离心啥用也没有。。。。。。

赞同,而且离心速度过快是不是会使蛋白失活不好说
19楼2010-12-29 17:45:21
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