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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】重叠延伸
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2004371310

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】重叠延伸

我有一个大约1800bp的基因，想对它中间的一段序列进向改造，如果我想先扩增出两个片段，分别是600bp和1200bp，然后再把这两个片段重叠延伸成一个完整的片段，想请教各位这样做是否可行。听说片段太大的话不好重叠延伸，有没有必要把这个片段分成更多的段数来进行重叠延伸呢？请大家不吝赐教，谢谢！
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1楼 2010-12-13 20:00:10
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Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)
2004371310(金币+1):谢谢！ 2010-12-13 22:21:14
重叠部分挺重要的，我原来以为长一些好，但结果好像并不是这样，重叠100个碱基的就没做出来，20-25个效果较好，gc高一些，合成时不易突变，退火也容易，不知道这个规律普遍不普遍。
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2楼2010-12-13 21:43:44
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)
2004371310(金币+1):谢谢！ 2010-12-13 22:21:26
没有必要分成更多的段数来进行重叠延伸

只要你的重叠引物设计的没问题，

就好重叠
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3楼2010-12-13 21:58:20
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