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天涯萧客

金虫 (正式写手)

放羊大叔

[交流] 【求助/交流】细菌的PCR问题 急求 已有2人参与

我想构建载体,目的片段是幽门螺杆菌中的一个CDS(编码序列),p出来是一条带,但是测序的时候NCBI没有完全一样的碱基序列,但是氨基酸的序列是有完全相同的。我想问的是细菌的基因是不是很容易突变,那怎样才知道你构建的是操作时突变还是本身这个细菌基因就是这样。
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100年后地球照样转
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fjt198719

木虫 (著名写手)

永远的菜鸟

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+2):谢谢交流 2010-12-01 18:43:17
这个问题吧,你扩的菌要是已经测过序的话(或者是NCBI上的菌),那就好说了。虽然说一般一样的菌基因都是保守的,但是碱基或者氨基酸还是有不同的,所以说你的菌没测过序的话,那就没办法了,只有用高保真酶来扩增了,进一步的话可以在大肠里表达下,看有效果没,个人愚见啊
独YY不如众YY!!!
3楼2010-12-01 16:54:57
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gao-feng

铁杆木虫 (著名写手)

疯子

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
和NCBI的序列相似度有多少啊?
开开心心做科研,踏踏实实做好人。
2楼2010-12-01 16:49:43
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fjt198719

木虫 (著名写手)

永远的菜鸟

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流 2010-12-01 18:43:26
碱基还是不太容易突变的,容易的话,那就没法做实验了,另外那大自然乱了套了,哈哈
独YY不如众YY!!!
4楼2010-12-01 16:57:35
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