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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】质粒单酶切后竟然两条带
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wangdandelia

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我觉得像是质粒提取的不够纯，是不是有基因组污染了？
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21楼2010-11-30 18:35:22
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xingxing342

银虫 (小有名气)
★ ★
silicare(金币+2):谢谢反馈 2010-12-04 10:45:51
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2010-11-30 16:49:01:


重新再切一下看看！也只能这样了！

不幸的是 重切也这样
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22楼2010-12-03 10:56:55
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xingxing342

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 46437772 at 2010-11-30 16:57:34:
质粒 5微
buffer 3微
酶 0.5微
水补到30微

37度酶切5-6小时

如果酶切条带要回收，质粒可以增加到8微

我的质粒确实多了点 呵呵 谢谢
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23楼2010-12-03 10:58:04
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xingxing342

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by dhmdddd at 2010-11-30 17:00:25:
你的酶切体系是什么呢？之前有段时间单酶切出现两条带，就是质粒浓度过高酶切不彻底，我觉得楼上说的还好啊，呵呵，可以参考下的啊！！

好的啊
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24楼2010-12-03 10:58:37
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xingxing342

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by easthero at 2010-11-30 18:03:37:
感觉你的酶切体系盐浓度有点偏高，切出两条带正常，不知你的目的基因片段大小多少，载体大小多少？

盐浓度有点偏高？这是怎么看出来的啊
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25楼2010-12-03 10:59:40
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gundamba

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你用的什么酶，如果有星号，切的时间过长会乱切的。最好还是复查一下序列！
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26楼2010-12-03 11:01:29
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xingxing342

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gundamba at 2010-12-03 11:01:29:
你用的什么酶，如果有星号，切的时间过长会乱切的。最好还是复查一下序列！

宝生物的 什么是星号啊
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27楼2010-12-03 12:59:56
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YaYa785

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1.只有一个质粒，但酶切位点不唯一...
2.含有多个质粒，提出多个而且都有那个酶切位点...
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28楼2010-12-03 14:39:57
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cpu2004

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
像是没有酶切干净的，但是质粒的质量着实一般
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29楼2010-12-04 10:02:52
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gundamba

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by xingxing342 at 2010-12-03 12:59:56:

宝生物的 什么是星号啊

有些酶酶切时间过长也不好，会乱切，大概是这个意思，你查一下宝生物的书，上面有写，或者在网上搜“星号活性”
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30楼2010-12-08 09:37:48
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