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林祎

木虫 (正式写手)

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没有切完全

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11楼2010-11-30 12:59:02

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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)

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从图上看，完全可以解释，你的质粒应该没有问题。

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我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。

12楼2010-11-30 13:33:45

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xingxing342

银虫 (小有名气)

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引用回帖:

Originally posted by 林祎 at 2010-11-30 12:59:02:
没有切完全

怎么能切完全呢？

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13楼2010-11-30 15:59:14

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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

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一般单酶切没有切完全的话就会出现两条带，一条是环状，一条是稍微大一些的线性DNA，可是看楼主这图怎么感觉有点奇怪呢？

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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!

14楼2010-11-30 16:13:50

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xingxing342

银虫 (小有名气)

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引用回帖:

Originally posted by 天使托 at 2010-11-30 16:13:50:
一般单酶切没有切完全的话就会出现两条带，一条是环状，一条是稍微大一些的线性DNA，可是看楼主这图怎么感觉有点奇怪呢？

呵呵我也很奇怪啊怎么会这样啊

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15楼2010-11-30 16:22:12

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wazlf

银虫 (正式写手)

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可能有两种质粒，他们有共同的没切位点！

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失败不是成功之母，是贻误战机！

16楼2010-11-30 16:39:22

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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

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引用回帖:

Originally posted by xingxing342 at 2010-11-30 16:22:12:

呵呵我也很奇怪啊怎么会这样啊

重新再切一下看看！也只能这样了！

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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!

17楼2010-11-30 16:49:01

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46437772

木虫 (小有名气)

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给你提供个参考体系

★
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质粒 5微
buffer 3微
酶 0.5微
水补到30微

37度酶切5-6小时

如果酶切条带要回收，质粒可以增加到8微

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18楼2010-11-30 16:57:34

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dhmdddd

木虫 (正式写手)

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你的酶切体系是什么呢？之前有段时间单酶切出现两条带，就是质粒浓度过高酶切不彻底，我觉得楼上说的还好啊，呵呵，可以参考下的啊！！

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上班族，学习ing……

19楼2010-11-30 17:00:25

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easthero

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感觉你的酶切体系盐浓度有点偏高，切出两条带正常，不知你的目的基因片段大小多少，载体大小多少？

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20楼2010-11-30 18:03:37

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