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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR的上下游引物碱基数需要相同么？
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Claire_Liu

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】PCR的上下游引物碱基数需要相同么？ 已有7人参与

如题，上下游碱基个数相差三个会有影响么？请哪位高手解答一下，谢谢~~

另外，祝感恩节快乐！
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1楼 2010-11-25 10:36:13
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不会，更重要的参数是%GC和碱基组成，决定二级结构、退火温度等热动力学特性
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2楼2010-11-25 10:47:50
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xuanmu0929

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1):鼓励交流！ 2010-11-25 19:12:44
不会的，GC%含量在40-50之间比较好，另外如果发生错配影响会较大，Tm值70左右比较好。
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3楼2010-11-25 11:02:26
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Claire_Liu

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by xuanmu0929 at 2010-11-25 11:02:26:
不会的，GC%含量在40-50之间比较好，另外如果发生错配影响会较大，Tm值70左右比较好。

计算G+C含量的时候要算酶切位点和保护碱基么？
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4楼2010-11-25 12:14:53
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skkyy88888

铜虫 (著名写手)
要计算啊。
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5楼2010-11-25 12:23:14
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perfectyw

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
在《pcr实验指南》里都有讲解
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6楼2010-11-25 12:43:39
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)
★
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引用回帖:
Originally posted by Claire_Liu at 2010-11-25 12:14:53:



计算G+C含量的时候要算酶切位点和保护碱基么？

G+C含量不是很重要，只要两条引物的Tm值相近、二者不会发生明显的配对就可以了。
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我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。
7楼2010-11-25 12:50:07
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魑魅-魍魉

新虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不用相同、但是Tm值得接近、不然不好P
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风中摇曳的颤枝，何处是归根？
8楼2010-11-25 12:50:15
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Claire_Liu

铜虫 (初入文坛)
多谢各位指点~~
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9楼2010-11-26 12:42:53
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