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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】做过离子交换色谱试验的请进
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zylksr

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】做过离子交换色谱试验的请进 已有3人参与

DEAE-琼脂糖凝胶
梯度洗脱，极限缓冲液1.5mol/L，初始缓冲液0.02mol/L，速度为5ml每管，每管117秒。总共洗脱了100管。
两个最重要的组分没有分开。活性峰几乎完全重叠。
并且这两个组分都集中在前40管中。
请问怎么改变条件使这两个分开？它们的等电点都在7以下。
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生活如此美好，引无数英雄竞折腰~
1楼 2010-11-21 22:58:24
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adslye

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by zylksr at 2010-11-21 22:58:24:
DEAE-琼脂糖凝胶
梯度洗脱，极限缓冲液1.5mol/L，初始缓冲液0.02mol/L，速度为5ml每管，每管117秒。总共洗脱了100管。
两个最重要的组分没有分开。活性峰几乎完全重叠。
并且这两个组分都集中在前40管中。
请 ...

你确定你的两个组分能用这个方法分开？预处理时有没有把你目标的电荷性质改变的步骤，自己没注意。 你要分的是什么？是蛋白吧？
可以描述详细点，大家一起讨论~~
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2楼2010-11-22 00:14:55
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zylksr

新虫 (初入文坛)
就是硫酸铵沉淀，之后用起始缓冲液透析，然后上样的。
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生活如此美好，引无数英雄竞折腰~
3楼2010-11-22 17:01:35
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月月大可

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
DEAE颗粒比较大，换用Q柱试一试吧。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-11-22 17:08:31
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