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zj快乐7008

银虫 (小有名气)

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[交流] 【求助】液相重现性问题，隔天测同一个样品时差别很大？？？已有17人参与

安捷伦高效液相-蒸发光散射检测器，测定同一个样品时，隔天测定时差别很大，保留时间相差最大10min左右，测定条件都没有发生变化啊。这是怎么回事呢？我还是没有弄清楚

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有时候真觉得大城市人没有县城人甚至个体户幸福已经有10人回复

1楼 2010-11-16 16:28:20

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lhc1984

木虫 (小有名气)

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专业: 中药药效物质

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保留时间不重现可能由多种因素引起，通常还会影响到峰面积的重现性，建议检查以下几个方面：
1.确认流动相是新鲜配制的，比例没有错误。比如一些挥发性的溶液，如乙酸，最好及时更换。
2.确认色谱条件在色谱柱使用范围之内，如pH 范围、温度、压力。
3.仔细观察柱前压的变化，如果压力稳定，就可以判断泵的系统没有问题；如果是压力不稳定，一定会影响保留时间，这种状况通常是由于泵头里有气泡造成的。请将流动相仔细脱气，并排出泵内气泡。
4.观察色谱峰形、柱效变化情况，确认色谱柱是否被污染，如果确定色谱柱污染，可尝试使用适当溶剂冲洗。
5.如果使用梯度洗脱方法，请确认平衡时间足够长。流动相中使用离子对试剂（烷基磺酸钠等）或固定相为正相硅胶等，往往需要更长的平衡时间。
6.确认样品是否过载，减少进样量（进原进样量的10%确认）。
7.组分在色谱柱中保留不够。调整色谱条件，使样品在柱上适当保留。

尤其注意5、6、7三点