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北平1949

新虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助】紫外分光光度法测定聚合物胶束的临界胶束浓度问题，求助！！！！！！！！！已有8人参与

最近一直在忙这个临界胶束浓度测定的问题，看了一些文章，说紫外分光法可以做，就试了下，但是做出来没趋势，找不到CMC点，请各位帮我看下问题出在哪？
仪器用的是DU640测，配制了5.23μmol/L的溴酚蓝溶液，配制浓度从0.05mg/L-500mg/L的样品10个（从1mg/ml的原液稀释而来），问题就随之而来了
1、到底是把胶束稀释液加入溴酚蓝里面，还是溴酚蓝加入到胶束稀释液？体积比应该是多少比多少？
2、测定时，空白液是哪个？溴酚蓝还是双蒸水还是胶束稀释液？之前做的话，如果用溴酚蓝做空白，那么样品测出的吸光度都是负值，如果用双蒸水或胶束稀释液，吸光度都是正值，但是没趋势。
3、测定的时候要参比液吗？因为仪器的原因，每次只能放一个比色皿在内进行测量。
4、后来换了个可以同时放2个比色皿的仪器（岛津的uv2401）测，结果还是没趋势，不知问题出在哪?
5、如果这个紫外做不出来的话就算了，打算换芘荧光测，反正试剂也买来了，就怕芘荧光也出现类似的问题就麻烦了。

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1楼 2010-11-15 19:44:07

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qingbo62

木虫 (正式写手)

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yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！ 2010-12-05 20:11:59
yusen_1982(金币+1):欢迎常来 2010-12-05 20:12:10
americanyk(金币+1):Thank you for qingbo62 2010-12-06 02:19:22

我没有用过溴酚蓝测CMC，用过DPH，也是用紫外的方法测定。其实用的最多是用pyrene作为荧光分子的探针。

1、你的胶束是一个什么样的结构？可以先预测它的CMC在什么范围的。所以500 mg/L的最大浓度是不是适合？另外，用UV测的CMC比真实的CMC要大一个数量级左右，所以你最大浓度可以大一些。

2、胶束和探针溶液哪个加到哪个是没有关系的，因为发生的过程主要是探针插入到疏水核中的过程，是一个热力学最终稳定的过程，与过程无关。

3、空白溶液是用双蒸水。探针可能本身有一定的吸收，你做图的过程就明白了。
另外：如果用溴酚蓝做空白，吸光度是负值，只能说明你的实验有问题。

4、不需要参比液，用水做过空白就可以了，扫全谱。

我的疑问是用溴酚蓝这种方法有多可靠？一般来说，Probe应该是一个疏水分子，但是溴酚蓝是一个亲水分子。另外，你的胶束是什么样的结构？你把结构说出来，我看看大概CMC和稳定性是怎么样的。