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amilie030312

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果乙醇挥发的不干净后续做有酶参与的反应会效果不好,酶切会有星号活性,PCR会影响PCR酶的活性使效率下降
11楼2010-11-12 12:25:14
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xuewenling

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 杜杜 at 2010-11-12 08:26:48:

我提DNA的时候,干燥后都可以看到有白色的DNA,但跑电泳的时候啥也没有,这是为什么呢?是不是和DNA的量也有关系啊,量少了就跑不出来?

白色的应该不是DNA,如果有那么多的DNA,随便跑跑都能看得见的应该
12楼2010-11-12 16:44:56
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
酒精作用是沉淀DNA,对DNA具有洗涤作用去除杂质,但有酒精会影响下步反应,比如酶切或者连接等,所以要干燥一下。
hehe
13楼2010-11-12 16:59:15
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xiezhenrong

金虫 (正式写手)

北斗星

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):鼓励交流 2010-11-13 13:15:36
有DNA的话肯定电泳能跑出来,怀疑你压根DNA就没提出来,你用什么提的?试剂盒的话按说明书操作一般都能提出来,建议你再重新提一下看看什么原因。
海阔凭鱼跃,天高任鸟飞!
14楼2010-11-13 12:57:03
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hwamg

银虫 (正式写手)


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引用回帖:
Originally posted by 杜杜 at 2010-11-12 08:26:48:

我提DNA的时候,干燥后都可以看到有白色的DNA,但跑电泳的时候啥也没有,这是为什么呢?是不是和DNA的量也有关系啊,量少了就跑不出来?

用无水乙醇沉淀后离心,如果提的是质粒一般是看不到的。但如果是总DNA,即使有也只能看到痕迹量的白色。如果有太多的白色沉淀物,那说明你抽提的质量不纯,可能是蛋白质或RNA,电泳后泳道里会出现拖尾,RNA在最下面。你如果跑出来什么都没有,说明是其它杂质,细胞碎片什么的也有可能

这种情况下你用加等体积5M氯化锂溶液 冰上沉淀10min,再按照抽酚后的步骤做,可以进一步去除DNA里的杂质

[ Last edited by hwamg on 2010-11-13 at 14:50 ]
15楼2010-11-13 14:48:29
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pushizi

木虫 (小有名气)

pushizi


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有可能是多糖什么的物质,再除一次
但愿快乐不停歇,悲伤不再来~
16楼2010-11-14 23:01:27
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522080954

金虫 (正式写手)


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类似与化学中的稀释,本来DNA溶在水里,当加无水乙醇后DNA逐渐达到饱和至析出!
17楼2010-11-14 23:09:52
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zhangdengn

金虫 (正式写手)


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加无水乙醇是让DNA析出,至于干燥方面,只要不是太湿,不会有影响的!
没有最好,只有更棒!
18楼2010-11-14 23:21:44
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