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杜杜

金虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】提DNA，无水乙醇已有13人参与

提DNA的时候加完无水乙醇后为什么要干燥呢？不干燥有什么影响？

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1楼2010-11-11 16:53:09

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hwamg

银虫 (正式写手)

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引用回帖:

Originally posted by 杜杜 at 2010-11-12 08:26:48:

我提DNA的时候，干燥后都可以看到有白色的DNA，但跑电泳的时候啥也没有，这是为什么呢？是不是和DNA的量也有关系啊，量少了就跑不出来？

用无水乙醇沉淀后离心，如果提的是质粒一般是看不到的。但如果是总DNA，即使有也只能看到痕迹量的白色。如果有太多的白色沉淀物，那说明你抽提的质量不纯，可能是蛋白质或RNA，电泳后泳道里会出现拖尾，RNA在最下面。你如果跑出来什么都没有，说明是其它杂质，细胞碎片什么的也有可能

这种情况下你用加等体积5M氯化锂溶液冰上沉淀10min,再按照抽酚后的步骤做，可以进一步去除DNA里的杂质

[ Last edited by hwamg on 2010-11-13 at 14:50 ]