应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于引物退火温度
142/2返回列表上一页12
查看: 1664  |  回复: 13
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by weiminhb at 2010-11-02 09:27:12:



      感谢交流！你是说前8-10个循环用原引物退火温度PCR，后面的用新引物的退火温度PCR，是吗？那新引物的退火温度怎么确定啊？谢谢

引物合成单上面，50mM [Na+]的Tm加5~10度即可
赞一下 回复此楼
11楼2010-11-02 11:29:43
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冬虫夏草1

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by weiminhb at 2010-11-02 09:27:12:



      感谢交流！你是说前8-10个循环用原引物退火温度PCR，后面的用新引物的退火温度PCR，是吗？那新引物的退火温度怎么确定啊？谢谢

再用程序设计完引物后会给一个Tm值呀，一般减去5度就是退火温度！
赞一下 回复此楼
倚楼听风雨，淡看江湖路！
12楼2010-11-02 13:25:13
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

空谷幽风

金虫 (正式写手)
影响应该不会很大，但肯定有影响。较保险的方法是先比较一下两对引物的Tm值，前一半的循环设成较高的退火温度，后一半循环采用较低的退火温度
赞一下 回复此楼
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
13楼2010-11-02 13:36:34
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

camel3882

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by weiminhb at 2010-11-02 09:27:12:



      感谢交流！你是说前8-10个循环用原引物退火温度PCR，后面的用新引物的退火温度PCR，是吗？那新引物的退火温度怎么确定啊？谢谢

可以用一些软件来确定，比如说primer premier
赞一下 回复此楼
14楼2010-11-03 10:10:28
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 weiminhb 的主题更新
142/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭