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wxyer金虫 (正式写手)
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[交流]
TLC显色方法(接上)
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2．专属性显色剂 由于化合物种类繁多，因此专属性显色剂也是很多的，现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下： (1) 烃类 ①硝酸银／过氧化氢 检出物：卤代烃类。 溶液：硝酸银O.1g溶于水lml，加2-苯氧基乙醇lOOml，用丙酮稀释至200ml，再加30％过氧化氢1滴。 方法：喷后置未过滤的紫外光下照射； 结果：斑点呈暗黑色。 ②荧光素／溴 检出物：不饱和烃。 溶液：I．荧光素0.1g溶于乙醇lOOml；Ⅱ．5％溴的四氯化碳溶液。 方法：先喷(I)，然后置含溴蒸气容器内，荧光素转变为四溴荧光素(曙红)，荧光消失，不饱和烃斑点由于溴的加成，阻止生成曙红而保留荧光，多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。 ③四氯邻苯二甲酸酐 检出物：芳香烃。 溶液：2％四氯邻苯二甲酸酐的丙酮与氯代苯(10：1)的溶液。 方法：喷后置紫外光下观察。 ④甲醛／硫酸 检出物：多环芳烃。 溶液：37％甲醛溶液O.2ml溶于浓硫酸l0ml。 (2)醇类 ①3，5一二硝基苯酰氯 检出物：醇类。 溶液：I．2％本品甲苯溶液；Ⅱ．0.5％氢氧化钠溶液；Ⅲ．O.002％罗丹明溶液。 方法：先喷(I)，在空气中干燥过夜，用蒸气薰2min，将纸或薄层通过试液(Ⅱ)30s，喷水洗，趁湿通过(Ⅲ)15s，空气干燥，紫外灯下观察。 ②硝酸铈铵 检出物：醇类。 溶液：I．1％硝酸铈铵的0.2mol／L硝酸溶液；Ⅱ．N,N-二甲基-对苯二胺盐酸盐1.5g溶于甲醇、水与乙酸(128m1+25m1+1．5m1)混合液中，用前将(I)与(Ⅱ)等量混合。喷板后于105oC加热5min。 ③香草醛／硫酸 检出物：高级醇、酚、甾类及精油。 溶液：香草醛1g溶于硫酸lOOml。 方法：喷后于120oC加热至呈色最深。 ④二苯基苦基偕肼 ’ 检出物：醇类、萜烯、羰基、酯与醚类。 溶液：本品15mg溶于氯仿25ml中。 方法：喷后于110oC加热5～lOmin。 结果：紫色背景呈黄色斑点。 (3)醛酮类 ①品红／亚硫酸 检出物：醛基化合物。 溶液：I．0.01%品红溶液，通入二氧化硫直至无色；Ⅱ．0.05mol／L氯化汞溶液； Ⅲ．O.05mol／L硫酸溶液。 方法：将I、Ⅱ、Ⅲ以1：1：10混合，用水稀释至l00ml。 ②邻联茴香胺 检出物：醛类、酮类。 溶液：本品乙酸饱和溶液。 ③2，4-二硝基苯肼 检出物：醛基、酮基及酮糖。 溶液：I．0.4％本品的2mol／L盐酸溶液； Ⅱ．本品O.1g溶于乙醇l00ml中，加浓盐酸lml。 方法：喷溶液I或Ⅱ后，立即喷铁氰化钾的2mol／L盐酸溶液。 结果：饱和酮立即呈蓝色；饱和醛反应慢，呈橄榄绿色；不饱和羰基化合物不显色。 ④绕丹宁 检出物：类胡萝卜素醛类。 溶液：I．1%～5%绕丹宁乙醇溶液；Ⅱ．25%氢氧化铵或27%氢氧化钠溶液。 方法：先喷溶液I，再喷溶液Ⅱ，干燥。 (4)有机酸类 ①溴甲酚绿 检出物：有机酸类。 溶液：溴甲酚绿0.1g溶于乙醇500ml和0.1mol/L氢氧化钠溶液5ml。 方法：浸板。 结果：蓝色背景产生黄色斑点。 ②高锰酸钾／硫酸 检出物：脂肪酸衍生物。 溶液：见通用显色剂酸性高锰酸钾。 ③过氧化氢 检出物：芳香酸。 溶液：0.3%过氧化氢溶液。 方法：喷后置紫外光(365nm)下观察。 结果：呈强蓝色荧光。 ④2，6-二氯苯酚-靛酚钠 检出物：有机酸与酮酸。 溶液：0.1%本品的乙醇溶液。 方法：喷后微温。 结果：蓝色背景呈红色。 (5)酚类 ①Emerson 试剂(4-氨基安替比林／铁氰化钾(Ⅲ)) 检出物：酚类、芳香胺类及挥发油。 溶液：I．4-氨基安替比林1g溶于乙醇100ml；Ⅱ．铁氰化钾(Ⅲ)4g溶于水50ml，用乙醇稀释至100ml。 方法：先喷溶液I，在热空气中干燥5min，再喷溶液Ⅱ，再于热空气中干燥5min，然后将板置含有氨蒸气(25％氨溶液)的密闭容器中。 结果：斑点呈橙-淡红色。挥发油在亮黄色背景下呈红色斑点。 ②Boute 反应 检出物：酚类、氯、溴、烷基代酚。 方法：将薄层置有NO2蒸气(含浓硝酸)的容器中3～10min，再用NH2蒸气(浓氨液)处理。 ③氯醌(四氯代对苯醌) 检出物：酚类。 溶液：1％本品的甲苯溶液。 ④DDQ(二氯二氰基苯醌)试剂 检出物：酚类。 溶液：2％本品的甲苯溶液。 ⑤TCNE (四氰基乙烯)试剂 检出物：酚类、芳香碳氢化物、杂环类、芳香胺类。 溶液：0.5%～1%本品的甲苯溶液。 ⑥Gibb’s(2，6-二溴苯醌氯亚胺)试剂 检出物：酚类。 溶液：2%本品的甲醇溶液。 ⑦氯化铁 检出物：酚类、羟酰胺酸。 溶液：1%～5%氯化铁的0.5mol／L盐酸溶液。 结果：酚类呈蓝色、羟酰胺酸呈红色。 (6)含氮化合物 ①FCNP(硝普钠／铁氰化物)试剂 检出物：脂 肪族含氮化物，如氨基氰、胍、脲与硫脲及其衍生物，肌酸及肌酐。 溶液：10％氢氧化钠溶液、10％硝普钠溶液、10％铁氰化钾溶液与水按1：1：1：3混合，在室温至少放置20min，冰箱保存数周，用前将混合液与丙酮等体积混合。 ②Dragendorff(碘化铋钾试剂)试剂 检出物：芳香族含氮化合物，如生物碱类、抗心律不齐药物。 溶液：I．碱式硝酸铋0.85g溶于10ml冰醋酸及40ml水中；Ⅱ．碘化钾8g溶于水20ml中。 将上述溶液I及Ⅱ等量混合，置棕色瓶中作为储备液，用前取储备液lml、冰醋酸2ml与水l0ml混合。 结果：呈橘红色斑点。 ③4-甲基伞形酮 检出物：含氮杂环化合物。 溶液：本品0.02g溶于乙醇35ml，加水至100ml。 方法：喷板后置25％氨水蒸气的容器中,取出后于紫外灯(365nm)下观察。 ④碘铂酸钾 检出物：生物碱类及有机含氮化物。 溶液：10％六氯铂酸溶液3ml与水97ml混合，加6％碘化钾溶液，混匀。临用前配制。 ⑤硫酸高铈铵／硫酸 检出物：生物碱及含碘有机化物。 溶液：硫酸铈1g混悬于4ml水中，加三氯乙酸1g，煮沸，逐滴加入浓硫酸直至混浊消失。 方法：喷后薄层于1l0oC加热数分钟。 结果：阿朴吗啡、马钱子碱、秋水仙碱、罂粟碱、毒扁豆碱与有机碘化物均能检出。 ⑥Ehrlich (对二甲氨基苯甲醛／盐酸)试剂 检出物：吲哚衍生物及胺类。 溶液：1％本品的浓盐酸溶液与甲醇按1：1混合。 方法：喷后板于50oC加热20min。 结果：呈不同颜色的斑点。 (7)胺类 ①硝酸／乙醇 检出物：脂肪族胺类。 溶液：50滴65％硝酸于乙醇100ml中。 方法：需要时120oC加热。 ②2，6-二氯醌氯亚胺 检出物：抗氧剂、酰胺(辣椒素)、伯、仲脂肪胺、仲、叔芳香胺、芳香碳氢化物、药物、苯氧基乙酸除草剂等。 溶液：新鲜制备的0.5％～2％本品乙醇溶液。 方法：喷后薄层于110oC加热10min，再用氨蒸气处理。 ③茜素 检出物：胺类。 溶液：O.1％本品的乙醇溶液。 ④丁二酮单肟／氯化镍 检出物：胺类。 溶液：I．丁二酮单肟1.2g溶于热水35ml中，加氯化镍0．95g，冷却后加浓氨水2ml； Ⅱ．盐酸羟胺0.12g溶于200ml水中。 方法：将溶液I及Ⅱ混合，放置1天，过滤。 ⑤Pauly (对氨基苯磺酸)试剂 检出物：酚类、胺类和能偶合的杂环化合物。 溶液：磺酸4．5g溶于温热的12mol／L盐酸45ml中，用水稀释至500ml，取lOml于冰中冷却，加4．5％亚硝酸钠冷溶液lOml，于OoC放置15min。用前加等体积10％碳酸钠溶液。 ⑥硫氰酸钴(Ⅱ)． 检出物：生物碱、伯、仲、叔胺类。 溶液：硫氰酸铵3g与氯化钴1g溶于水20ml。 结果：白色至粉红色背景上呈蓝色斑点，2h后颜色消退。若将薄层喷水或放入饱和水蒸气容器内，可重现色点。 ⑦1，2-萘醌-4-磺酸钠 检出物：芳香胺类。 溶液：本品0.5g溶于95ml水，加乙酸5ml，滤去不溶物即得。 方法：喷后反应30min显色。 ⑧葡萄糖／磷酸 检出物：芳香胺类。 溶液：葡萄糖2g溶于85％磷酸l0ml与水40ml混合液中，再加乙醇与正丁醇各30ml。 方法：喷后于115℃加热l0min。 (8)硝基及亚硝基化合物 ①α-萘胺 检出物：3，5一二硝基苯甲酸酯、二硝基苯甲酰胺。 溶液：I．O．5％α-萘胺乙醇溶液； Ⅱ．10％氢氧化钾甲醇溶液。 方法：先喷溶液I，再喷溶液Ⅱ。 结果：呈红褐色斑点。 ②二苯胺／氯化钯 检出物：亚硝胺类。 溶液：1.5％二苯胺乙醇溶液与0.1g氯化钯的0.2％氯化钠溶液lOOml，按5：1混合。 方法: 喷后置紫外光(254nm)下观察。 结果：显紫色斑点。 (9)氨基酸及肽类 ①茚三酮 检出物：氨基酸、胺与氨基糖类。 溶液：本品O.2g溶于乙醇l00ml中。 方法：喷后于110oC加热。 结果：呈红紫色斑点。 ②茚三酮／乙酸镉 检出物：氨基酸及杂环胺类。 溶液：茚三酮1g及乙酸镉2.5g溶于l0ml冰醋酸中，用乙醇稀释至500ml。 方法：喷后于120oC加热20min。 ③1，2-萘醌-4-磺酸钠 检出物：氨基酸。 溶液：临用前将本品O.02g溶于5%碳酸钠l00ml中。 方法：喷后室温干燥。 结果：不同氨基酸呈不同色点。 ④靛红／乙酸锌 检出物：氨基酸与某些肽类。 溶液：靛红1g与乙酸锌1g溶于95％异丙醇l00ml中，加热至80oC，冷却后加乙酸1ml，冰箱保存。 方法：喷后于80～85"C加热30min。 ⑤茚三酮／冰醋酸 检出物：二肽及三肽。 溶液：1％茚三酮吡啶溶液与冰醋酸按5：1混合。 方法：喷后于l00oC加热5min。 ⑥香草醛 检出物：氨基酸及胺类。 溶液：I．本品1g溶于丙醇50ml中; Ⅱ．1mol／L氢氧化钾溶液lml，用乙醇稀释至lOOml。 方法：先喷溶液I后于110oC干燥l0min，再喷溶液Ⅱ，于110oC再干燥l0min，于紫外光(365nm)下观察。 (10)甾类 ①香草醛／硫酸 检出物：甾体激素。 溶液：1％香草醛浓硫酸溶液。 方法：喷后于105℃加热5min。 ②氯化锰 检出物：雌激素类。 溶液：氯化锰0.2g溶于含硫酸2ml的甲醇60ml中。 方法：喷后置紫外光(365nm)下观察。 ③高氯酸 检出物：甾体激素。 溶液：5％高氯酸甲醇溶液。 方法：喷后于110oC加热5min，置紫外光(365nm)下观察。 ④三氯化锑／乙酸 检出物：甾类与二萜类。 溶液：三氯化锑20g溶于乙酸20ml与氯仿60ml混合液中。 方法：喷后于100oC加热5min，紫外光长波下观察。 结果：二萜类斑点呈红黄-蓝紫色。 ⑤对甲苯磺酸 检出物：甾族化合物、黄酮类与儿茶酸类。 溶液：20％本品的氯仿溶液。 方法：喷后于100oC加热数分钟，紫外光长波下观察。 结果：斑点呈荧光。 ⑥氯磺酸／乙酸 检出物：三萜、甾醇与甾族化合物。 溶液：氯磺酸5ml在冷却下加乙酸l0ml溶解。 方法：喷后于130oC加热5～l0min，置紫外光长波下观察。 结果；斑点显荧光。 (11)糖类 ①茴香胺、邻苯二酸试剂 检出物：碳氢化合物。 溶液：1.23g茴香胺及1.66g邻苯二酸于l00ml 95％乙醇中的溶液。 方法：喷雾或浸渍。 结果：己糖呈绿色、甲基戊糖呈黄绿色、戊糖呈紫色、糖醛酸呈棕色。 ②四乙酸铅／2，7一二氯荧光素 检出物：甙类、酚类、糖酸类 溶液：I．2％四乙酸铅的冰醋酸溶液；Ⅱ．1％2，7一二氯荧光素乙醇溶液。 取溶液I、Ⅱ 各5ml混匀，用干燥的苯或甲苯稀释至200ml，试剂溶液只能稳定2h。 方法：浸板。 ③邻氨基联苯／磷酸 检出物：糖类。 溶液：O.3g邻氨基联苯加85％磷酸5ml与乙醇95ml。 方法：喷板后llOoC加热15～20min。 结果：斑点呈褐色。 ④苯胺／二苯胺／磷酸 检出物：还原糖。 溶液：4g二苯胺、4ml苯胺与20ml 85％磷酸共溶于200ml丙酮中。 方法：喷后于85℃加热l0min。 结果：产生各种颜色。1，4-己醛糖、低聚糖呈蓝色。 ⑤双甲酮／磷酸 检出物：酮糖。 溶液：双甲酮(5，5-二甲基环己烷-1，3-二酮)10.3g溶于90ml乙醇与l0ml 85％磷酸中。 方法：喷板后于110oC加热15～20min。 结果：日光下观察，白色背景上呈黄色斑点，紫外光长波下呈蓝色荧光。 ⑥联苯胺／三氯乙酸 检出物：糖类。 溶液：0.5g联苯胺溶于l0ml乙酸，再加10ml40％三氯乙酸水溶液，用乙醇稀释至l00ml。 方法：喷后置紫外光下照射15min。 结果：斑点呈灰棕-红褐色。 ⑦对二甲氨基苯甲醛／乙酰丙酮 检出物：氨基糖类。 溶液：I. 5ml 50％氢氧化钾溶液与20ml乙醇混匀，取此溶液0.5ml，加乙酰丙酮0.5ml与正丁醇50ml的混合液l0ml，此两种溶液均需新鲜配制，临用前混合； Ⅱ. 1g对二甲氨基苯甲醛溶于30ml乙醇中，再加30ml浓盐酸，需要时此溶液可用正丁醇180ml稀释。 方法：先喷I后于105oC加热5min，再喷Ⅱ，然后于90℃干燥5min。 结果：斑点呈红色。 (12)杀虫剂 ①甲基黄 检出物：氯化杀虫剂及抗菌化合物。 溶液：O.1g甲基黄于70ml乙醇中，加25ml水并用乙醇稀释至l00ml。 方法：喷板后于室温干燥，并在无滤光片紫外光下照射5min。 结果：黄色背景上呈红色斑点。 ②溴／四氯化碳 检出物：有机磷杀虫剂。 溶液：10％溴的四氯化碳溶液。 方法：薰溴蒸气。 ③锰／水杨醛 检出物：有机硫代磷杀虫剂。 溶液：I．100mg氯化锰溶于100ml 80％乙醇； Ⅱ．溶解1.3g 2-肼喹啉于小量热乙醇中，溶1g水杨醛于5ml乙醇并加1～2滴冰醋酸，合并两溶液并回流30min，冷却后析出水杨-2-醛-2-喹啉腙沉淀，并用乙醇重结晶。用50mg此衍生物溶于100ml乙醇中。 方法：等量溶液I及Ⅱ混合后，喷板。 ④二苯胺／氯化锌 检出物：氯化杀虫剂(DDT、CPCA、氯-DDT、克菌丹、甲氧氯、毒杀芬)。 溶液：二苯胺及氯化锌各0.5g溶于100ml丙酮中。 方法：喷后200oC加热5min。 ⑤溴／荧光素／硝酸银 检出物：杀虫剂。 溶液；I．5％溴的四氯化碳溶液； Ⅱ．1ml 0.25％荧光素的二甲基甲酰胺溶液，用乙醇稀释至50ml； Ⅲ．1.7g硝酸银溶于5ml水中，加2-苯氧基乙醇，用丙酮稀释至200ml。 方法：展开后的薄层置试液I容器中薰30s，取出先喷溶液Ⅱ，再喷溶液Ⅲ，再置紫外光下7min。 (13)黄酮类 ①乙醇胺二苯硼酸盐 检出物：黄酮类。 溶液：I. 1％乙醇胺二苯硼酸盐的甲醇溶液；Ⅱ. 5％聚乙二醇的乙醇溶液。 方法：先喷溶液I，再喷溶液Ⅱ使荧光稳定，再在紫外光长波下照射2min。 结果：紫外灯下观察荧光。 ②三氯化锑 检出物：黄酮类。 溶液：10％三氯化锑的氯仿溶液。 方法：喷板。 结果：紫外光长波下呈荧光。 ③三氯化铝 检出物：黄酮类。 溶液：1％三氯化铝乙醇溶液。 方法：喷板。 结果：紫外光长波下显黄色荧光。 ④Benedict(硫酸铜／枸橼酸钠)试剂 检出物：含邻二羟基的黄酮类及香豆精类。 溶液：1.73g 硫酸铜(CuS04•5H20)：17.3g 枸橼酸钠及10g 无水碳酸钠溶于水并稀释至1 00ml。 方法：喷板。 结果：紫外光长波下观察，含邻二羟基的化合物，斑点荧光减弱或猝灭。 (14)含硫化合物 ①硝普钠 检出物：巯基-SH基(半胱氨酸)、双硫化物、-s-s-基(胱氨酸)及精氨酸。 溶液：I. 1.5g 硝普钠溶于5ml 2mol／L盐酸溶液及95ml甲醇中，加10ml 25％氢氧化铵溶液，过滤，即得；Ⅱ. 2g氰化钠溶于5ml水，用甲醇稀释至100ml。 方法：先喷溶液I、再喷溶液Ⅱ。 结果：巯基化合物呈红色；精氨酸由橙变为灰蓝色；双硫化物在黄色背景上显红色。 ②FCNP(硝普钠／铁氰化物)试剂 检出物：脂肪族含硫化台物，如氨基氰、硫脲及其衍生物。 溶液：10％氢氧化钠溶液、10％硝普钠溶液，10％铁氰化钾溶液与水按1：1：1：3混合，用前与等体积丙酮混合，用时新鲜配制。 ○3氯化铁／磺基水杨酸 检出物：硫代磷酸酯类。 溶液：I．1％氯化铁的80％乙醇溶液；Ⅱ．1％磺基水杨酸的80％乙醇溶液， 方法：薄层先置溴蒸气中10min后，喷溶液I，干燥15min，再喷溶液Ⅱ。 结果：紫色背景上呈白色。 ④叠氮化碘 检出物：含硫氨基酸、硫化物与青霉素。 溶液：叠氮碘溶液-叠氮钠3g 溶乎100ml 0.05mol／L碘溶液中(新鲜配制，固体叠氮碘有爆炸性)。 ⑤靛红／硫酸 检出物：噻吩衍生物。 溶液；0.4g靛红溶于100ml浓硫酸中。 方法：喷板后120oC加热。 结果：呈不同颜色。 (15)类脂化合物 ①磷钼酸 检出物：胆酸、类脂化物、脂肪酸及甾类。 溶液：250mg 磷钼酸于50ml乙醇中。 方法：唆后予120oC加热。 ②罗丹明6G 检出物；类脂化物。 溶液：lg 罗丹明6G溶于100ml丙酮中． 方法：喷后置紫外光长波下观察。 ③溴百里酚蓝 检出物：类脂化物。 溶液：O．04g溴百里酚蓝溶于100ml O．01mol／L氢氧化钠溶液中。 (16)阳离子 ①双硫腙 检出物：金属离子。 溶液：20mg双硫腙溶于100ml丙酮中，置棕色瓶中于冰箱内保存。 方法：上述溶液喷板后再喷25％氢氧化铵溶液。 ②红氨酸 (二硫代草酰胺) 检出物：重金属离子。 溶液：0.5％红氨酸乙醇溶液。 方法：先喷上述溶液，稍干后置薄层于氨蒸气中。。 ③茜素 检出物：众多阳离子、稀土及铀。 溶液：茜素乙醇饱和溶液。 方法：喷板后直接放入氨蒸气中。 ④亚铁氰化钾 检出物：Fe3+、Cu2+、Cl、Mo、V、W离子。 溶液：新配制的2％亚铁氰化钾溶液。 ⑤二苯卡巴肼 检出物：Ag+、pb2+、Hg2+、Cu2+、Sn2+、Mn2+、Zn2+、Ni2+、Co2+及Ca2+离子。 溶液：I．1％～2％二苯卡巴肼乙醇溶液；Ⅱ．25％氢氧化铵溶液。 方法：先喷溶液I，再喷溶液Ⅱ。 结果：Ni2+呈蓝色、Co2+呈橙褐色、Zn2+呈红紫色，Ag+、pb2+、Cu2+、Sn2+、Mn2+呈褐色、乙酸汞加成物于80oC加热片刻，斑点呈蓝色。 (17)阴离子 ①硝酸银 检出物：含硫阴离子、砷酸盐、亚砷酸盐磷酸盐、亚磷酸盐及除氟外的卤素。 溶液：0.1～0.5mol／L硝酸银溶液中加氨水直至沉淀溶解。临用前配制、储存会形成易爆物质。 方法：喷后于110～120oC加热l0min，必要时置紫外光下l0min。 ②硝酸银／氢氧化铵／荧光素 检出物：卤素离子。 溶液：I．1g硝酸银溶于l00ml O.5mol／L氢氧化铵溶液中； Ⅱ．1g荧光索溶于l00ml乙醇中。 方法：先喷溶液I，稍干，再喷溶液Ⅱ。 ③钼酸铵／亚硫酸钠 检出物：硫化物、硫代硫酸盐与磷酸盐。 溶液：I．5％钼酸铵的lmol／L硫酸溶液； Ⅱ．5％亚硫酸钠溶液。 方法：先喷溶液I，再喷溶液Ⅱ，于105℃加热30min。 结果：硫化物及硫代硫酸盐呈深蓝色，磷酸盐呈蓝灰色。 ④番木鳖碱 检出物：溴酸盐、硝酸盐、氯酸盐。 溶液：I．0.02％番木鳖碱的lmol／L硫酸溶液； Ⅱ．2mol／L氢氧化钠溶液。 方法：先喷溶液I，再喷溶液Ⅱ |
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