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【求助/交流】PCR引物由于GC多超过60个碱基了，要涨成3.8元一个碱基，GC可以人为少吗�
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如题。 想跑细菌的亚硝酸盐氧化酶基因（NxrA,gene nxrA encoding the catalytic subunit of the nitrite oxidoreductase in nitrite-oxidizing bacteria (NOB))， 用的附件文章里已给出的引物。 共用三条引物，跑两轮PCR。为了接着DGGE F1370 F1 nxrA (5'-CAG ACC GAC GTG TGC GAA AG-3') F2843 R2 nxrA (5'-TCC ACA AGG AAC GGA AGG TC-3') F2842 F1 nxrA gc(5'-CGC CCG CCG CGC GCG GCG GGC GGG GCG GGG GCA CGG GGG GCA GAC CGA CGT GTG CGA AAG-3') 第二轮引物 有一条F2842 F1 nxrA前 就加了GC，总的碱基数就超了。 自己胡乱一个碱基，就变成59个，就变成1.5元一个碱基了。不然就是3.8*60=228元啊！！！ 自己设计引物 ，可我不会啊！！！ |
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