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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】试剂盒提不出RNA，求救啊
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gylry

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】试剂盒提不出RNA，求救啊 已有24人参与

本人刚开始提RNA，用的是百泰克试剂盒提背肌的RNA，过程都按说明书做的，预防措施都做了，可连做好几次，每次结果都不行，浓度超低，都是10几ng/ul，真是郁闷啊，那位仁兄可以指点指点啊？
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1楼 2010-10-26 09:33:28
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阿德54007

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+5):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-10-31 23:05:42
引用回帖:
Originally posted by ZOEY21 at 2010-10-31 10:06:25:

同问高手 研钵剪刀之类的要在烘箱高温灭菌180°多长时间？ 灭菌前也需要DEPC处理吗？ 我们的移液器是提DNA混用的，有说酒精擦就可以的，有说要专用的移液器，影响大吗？
谢谢啦!

我们一般都是在高温烘箱烘大约4至5小时左右（一般是中午烘，下午关烘箱，晚上自然冷却，第二天早晨收）。自己配置的试剂所用的水为DEPC灭菌水，枪头用DEPC水浸泡过夜，高温灭菌然后烘干。我们的移液器是专门的一套，不与DNA混用。用前移液器要用70%的酒精（DEPC水配制）擦拭。桌面、离心机、试管架都尽量擦。
其实没有专门的移液器也没大关系，只要枪头干净就可以。提取RNA的时候带口罩和手套。实验室的人也要带口罩（除非他不说话）。

我陆续提取了接近两个月的RNA，到最后熟练了，很多也都不管了，我专门使用普通的灭菌枪头，也不擦离心机、试管架和桌面提取结果也还不错。呵呵
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阳光温热，岁月静好，你还没来，我怎敢老
33楼2010-10-31 21:49:43
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silicare

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★
gylry(金币+1):为什么我就提不出来呢？人品太差了吗？ 2010-10-26 09:57:04
dhd997(金币+1):有意思。 2010-10-26 10:29:51
没有对照没法说明问题

到底是试剂盒质量呢，还是你的操作手法呢，还是试剂盒和材料不搭配呢

换个人提，换个试剂盒

问题就解决了
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2楼2010-10-26 09:39:13
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amilie030312

金虫 (正式写手)
★
gylry(金币+1):嗯，非常感谢！顺便问下，在液氮中研磨样品时是时间长点好呢还是短点好？ 2010-10-26 09:55:51
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-26 10:30:05
如果确定样本没问题就换个人做做看，把该注意到的细节都注意了，尽量快的提完，还是不行的话就换个试剂盒吧，给那个公司打电话投诉看看， 我还是比较建议用进口的试剂盒的，要不就纯手工提。
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3楼2010-10-26 09:43:28
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silicare

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★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
客观的讲，这个和人品关系不是很大

人品影响到态度，态度决定成败
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4楼2010-10-26 09:59:02
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