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gylry

铜虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】试剂盒提不出RNA，求救啊已有24人参与

本人刚开始提RNA，用的是百泰克试剂盒提背肌的RNA，过程都按说明书做的，预防措施都做了，可连做好几次，每次结果都不行，浓度超低，都是10几ng/ul，真是郁闷啊，那位仁兄可以指点指点啊？

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1楼2010-10-26 09:33:28

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阿德54007

金虫 (正式写手)

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scelab(金币+5):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-10-31 23:05:42

引用回帖:

Originally posted by ZOEY21 at 2010-10-31 10:06:25:

同问高手研钵剪刀之类的要在烘箱高温灭菌180°多长时间？灭菌前也需要DEPC处理吗？我们的移液器是提DNA混用的，有说酒精擦就可以的，有说要专用的移液器，影响大吗？
谢谢啦!

我们一般都是在高温烘箱烘大约4至5小时左右（一般是中午烘，下午关烘箱，晚上自然冷却，第二天早晨收）。自己配置的试剂所用的水为DEPC灭菌水，枪头用DEPC水浸泡过夜，高温灭菌然后烘干。我们的移液器是专门的一套，不与DNA混用。用前移液器要用70%的酒精（DEPC水配制）擦拭。桌面、离心机、试管架都尽量擦。
其实没有专门的移液器也没大关系，只要枪头干净就可以。提取RNA的时候带口罩和手套。实验室的人也要带口罩（除非他不说话）。

我陆续提取了接近两个月的RNA，到最后熟练了，很多也都不管了，我专门使用普通的灭菌枪头，也不擦离心机、试管架和桌面提取结果也还不错。呵呵