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幸福常在

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也是做跨膜蛋白,具七次跨膜结构,用过PET28a载体分别转过BL21(DE3)和具有稀有密码子的transset(DE3)宿主,同时做过两遍的时间诱导(2h,4h,6h)和浓度诱导(0.2,0.6,1.0,1.4的IPTG),同时做是其他基因完美诱导出来了,就是这个具有跨膜结构的一直SDS-PAGE无条带,现在转换PET32a载体转BL21(de3),但是一直连接不上,目前原核表达已经耗时近2个月共8次了,甚为纠结,含泪求各位战友指教!!!
11楼2012-04-09 09:41:12
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幸福常在

铁虫 (初入文坛)

我也是做跨膜蛋白,具七次跨膜结构,用过PET28a载体分别转过BL21(DE3)和具有稀有密码子的transset(DE3)宿主,同时做过两遍的时间诱导(2h,4h,6h)和浓度诱导(0.2,0.6,1.0,1.4的IPTG),同时做是其他基因完美诱导出来了,就是这个具有跨膜结构的一直SDS-PAGE无条带,现在转换PET32a载体转BL21(de3),但是一直连接不上,目前原核表达已经耗时近2个月共8次了,甚为纠结,含泪求各位战友指教!!!
12楼2012-04-09 09:41:39
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danqing1314

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问你后来做出来了吗

发自小木虫Android客户端
13楼2016-11-23 14:46:03
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