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呆米11

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】DEPC水 处理移液枪 已有2人参与

各位虫友大家好:我们实验室超净台中用来做分子的一套移液枪,近来有好几次被新来的师弟拿出来使用,我觉得再用那枪提取RNA就容易造成RNA的降解,想问一下大家你们实验室是怎样对移液枪进行无RNA酶的处理的,如用DEPC水杂泡的?希望能具体点,非常感谢!
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shuxian1

银虫 (小有名气)

★ ★
amisking(金币+2):good! 2010-10-20 20:13:19
呆米11(金币+2): 2010-10-21 17:12:50
提RNA之前要将枪头、EP管等塑料制品进行0.1%的DEPC水泡,但是枪头一般不能进行泡,所以我们配制0.1MNaOH和1mMEDTA的混合溶液,用卫生纸蘸湿擦洗,这个过程中都要戴手套,一般这样处理后能达到抑制RNA酶的效果,提出的RNA情况很好,希望对你有所帮助。
我与你一起闯天下
2楼2010-10-20 20:08:33
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virus2009

金虫 (正式写手)

人称 龙哥

★ ★
silicare(金币+2): 2010-10-21 08:30:12
呆米11(金币+1): 2010-10-21 17:13:34
枪还要用DEPC处理?没见过,提RNA只要记住关键几步注意点就行了,没必要做到所有的东西都要用depc处理,如果那样的话,你要保证你的手套之类的东西都要经DEPC处理,我一般做RNA只是处理水,枪头盒,电泳仪,枪头用进口,枪就用无水乙醇擦拭一下就好了。记住拿枪带手套就是了,不会对提RNA有太大影响的!!!
virus
3楼2010-10-20 20:27:15
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虫子火箭兵

金虫 (正式写手)

呆米11(金币+1): 2010-10-21 17:13:40
枪就不用处理了,枪头买点无酶的就可以了
4楼2010-10-20 20:31:30
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xingxing342

银虫 (小有名气)

呆米11(金币+1): 2010-10-21 17:13:48
我们没有专用的枪,每次用之前用酒精擦一下,没有影响的,一直能提出来。
5楼2010-10-21 15:58:58
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taigongzaici

新虫 (小有名气)

呆米11(金币+1): 2010-10-28 18:34:18
没那么夸张,不放心用酒精猜猜,
6楼2010-10-21 19:21:02
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路人甲007

木虫 (正式写手)

小七

★
dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-10-28 12:50:02
没有那么严谨的吧
我提取RNA的时候 主要是把超净台用酒精擦洗几遍  枪用酒精擦,tip、ep都是无RNAASE的,照紫外就可以了
一直都没有什么问题
与人玫瑰手有余香
7楼2010-10-28 12:19:14
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gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

★
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-28 12:50:09
枪好像不用DEPC处理吧,我只是把枪头、管子等塑料容器泡一下,操作时戴手套、口罩就没有大问题。
持之以恒、永不放弃!
8楼2010-10-28 12:36:17
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zjzz

木虫 (正式写手)

在通往变态的坦途上

实验室提RNA一直用的日常操作的枪,在提RNA之间用买的RNase away溶液擦拭了一下外表而已
终于熬成木虫了……
9楼2010-10-28 21:37:37
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jackiechubut

木虫 (小有名气)

一般需要处理的也就是离心管、枪头什么的,提RNA的时候一般就用酒精擦擦枪就可以了,带上乳胶手套(可以少换)和口罩(如果必要的话)。实验室如果有RNase-free的枪头和离心管就更方便了
一笑寂寥空万古,三分明月照大江
10楼2010-10-28 22:07:39
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