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gbrillia

银虫 (小有名气)

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dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-16 10:14:53
载体和目的片段的浓度都是可以测量的,根据测得的浓度和载体和片段的分子量算出二者的摩尔数,再确定连接时加入的体积。我们现在用的是eppendorf的分光光度计就能测DNA的浓度
11楼2010-10-16 09:55:55
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piratenb

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用NEB的好了
眼的世界
12楼2010-10-16 10:03:37
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aaron2012

银虫 (初入文坛)

★ ★
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dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-16 10:15:01
连接比换成高点   一般是2:1到10:1  都可以的然后连接时间长点  我们一般都是过夜   一般都能连接上   你试一下
生物,特别是分子生物,贵在坚持!
13楼2010-10-16 10:09:59
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天龙n部

金虫 (小有名气)

★ ★
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dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-16 14:48:40
你算下你的载体和目的基因的摩尔比,最好达到1:3这样一般就可以额。还有就是可能你的buffer用久了,里面的ATP挥发了,补救措施要么换个新的buffer,要么在原buffer里加点ATP。最后,可能是你的酶失效了,如果你们用煤一直在冰盒里的话一般不会出现这种情况。体系做正交那没必要,不是浪费酶嘛
14楼2010-10-16 14:12:10
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