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luckydong1

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】哪位同仁做过噬菌体肽库或者抗体库淘筛的,请一定要进来呀~~~~已有9人参与

我在做噬菌体肽库的淘筛,是筛一种蛋白,富集的时候包板是以包被液为空白对照,以高浓度的BSA做封闭液,用不同的洗脱方法做了多次,问题在于以包被液为空白对照获得的重组菌总是比试验组的多,不知道有没有同仁在富集的时候也做过阴性对照做比较的,这阴性对照的重组菌较多,是不是说明吸附包被原的阳性克隆就比较少,甚至没有呢?这淘筛做了很久,望有经验的虫友赐教了
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huoyongting

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
封闭液中有加tween20没,我以前遇到这种情况,加了tween有所改善,我是做人源化和亲和力成熟的单链抗体库时遇到的,当时是因为库的质量不好,库的质量上去了筛选就简单了
11楼2012-09-12 10:39:00
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