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djn880607

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】PCR产物的条带在2000bp以上，为什么？ 已有2人参与

我做的是RAPD PCR，用6个随机引物扩增菌的DNA，结果条带在2000bp以上，且呈同一水平线，像总DNA的位置，是什么原因呢？
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1楼 2010-09-27 19:25:27
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小小豆豆

金虫 (小有名气)
pcr时是如何设定步骤的啊
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2楼2010-09-27 19:33:41
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djn880607

新虫 (初入文坛)
PCR反应体系                                25ul
10xbuffer（含MgCl2）                       2.5ul
dNTP   （10mM）                          0.4ul
随机引物                                   0.5ul
rTaq（5U/ul）                               0.2ul
模板DNA                                  2.5ul
ddH2O                                     21.4ul

PCR扩增程序：
94 °C                            5 min
   94 °C                            1 min
   36 °C                            2 min      
   72 °C                            2 min
   72 °C                            7 min
    4 °C                             ∞

步骤2~4重复40个循环
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3楼2010-09-28 18:59:57
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