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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】最近购买的荧光标记的P糖蛋白抗体的使用问题
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蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】最近购买的荧光标记的P糖蛋白抗体的使用问题 已有3人参与

我打算用此抗体通过流式检测细胞表面P糖蛋白的表达量差异。
说明书中说是多抗，这种抗体有单抗的吧？
用于FCM： 1：20-100，这是说用于流式的稀释倍数，是不是稀释倍数越小越好呢？
同型对照抗体是不是必须要做的？如何选择阴型同型对照抗体呢！
我用的抗体是FITC标记的P-糖蛋白抗体
谢谢交流与帮助！

[ Last edited by 蜗牛VS蜗牛 on 2010-9-19 at 09:49 ]
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1楼 2010-09-18 09:27:32
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蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)
没人来回贴呀
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2楼2010-09-21 16:52:18
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reasonspare

木虫 (著名写手)
★
蜗牛VS蜗牛(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by 蜗牛VS蜗牛 at 2010-09-18 09:27:32:
我打算用此抗体通过流式检测细胞表面P糖蛋白的表达量差异。
说明书中说是多抗，这种抗体有单抗的吧？
用于FCM： 1：20-100，这是说用于流式的稀释倍数，是不是稀释倍数越小越好呢？
同型对照抗体是不是必须要做 ...

对不起，我这方面的经验有限，尽可能才考文献报道，使用说明。
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大慈大悲观世音救苦救难观世音有求必应观世音普渡众生观世音千手千眼观世音官大敢管观世音无处不在观世音普观普长观世音南无观世音菩萨
3楼2010-09-28 05:37:43
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蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by reasonspare at 2010-09-28 05:37:43:


对不起，我这方面的经验有限，尽可能才考文献报道，使用说明。

嗯，还是要感谢你。
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4楼2010-09-28 08:24:03
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
★
蜗牛VS蜗牛(金币+1):谢谢参与
蜗牛VS蜗牛(金币+8): 2010-09-28 12:59:36
引用回帖:
Originally posted by 蜗牛VS蜗牛 at 2010-09-18 09:27:32:
我打算用此抗体通过流式检测细胞表面P糖蛋白的表达量差异。
说明书中说是多抗，这种抗体有单抗的吧？
用于FCM： 1：20-100，这是说用于流式的稀释倍数，是不是稀释倍数越小越好呢？
同型对照抗体是不是必须要做 ...

抗体稀释度是要自己摸索一下的，人家公司给的是建议稀释范围，是给你参考的。
同型对照肯定要做，一般实验不是都要做对照么，特别FC又这么敏感还是做了吧。可以选择你购买的多抗的同种属的阴性血清，如果 你要购买和别人一说人家就知道了。
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52187644
5楼2010-09-28 09:41:59
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蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by dianaofyezi at 2010-09-28 09:41:59:

抗体稀释度是要自己摸索一下的，人家公司给的是建议稀释范围，是给你参考的。
同型对照肯定要做，一般实验不是都要做对照么，特别FC又这么敏感还是做了吧。可以选择你购买的多抗的同种属的阴性血清，如果 你要 ...

谢谢，终于等到人解决我的问题了。
我做的是两组细胞，一组亲本株，另一组是药物刺激后形成的耐药株。
理论上是亲本株P糖蛋白低表达，耐药株P糖蛋白高表达。
阴性同型对照起什么作用？
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6楼2010-09-28 13:03:58
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
就是对照作用的。
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52187644
7楼2010-09-28 15:42:22
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蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by dianaofyezi at 2010-09-28 15:42:22:
就是对照作用的。

能说的清楚点吗，我的两组实验不能准确反应实际情况吗？？？
同型阴性对照是不是就是防止假阳性的出现？

[ Last edited by 蜗牛VS蜗牛 on 2010-9-29 at 08:27 ]
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8楼2010-09-28 21:34:27
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是为了检测抗体非特异性的结合到你待检测物质上的。一般在IHC或FC中都要求做。
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52187644
9楼2010-09-29 09:37:17
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cycici1028

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5): 给个红包，谢谢回帖
求楼主介绍实验方法 我也要做流式细胞仪检测耐药蛋白
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10楼2012-03-13 13:36:15
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