24小时热门版块排行榜    

查看: 1810  |  回复: 14

amilie030312

金虫 (正式写手)

★ ★
scelab(金币+2):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-10-12 23:25:41
如果用的是3‘平末端的就用平末端能连上的酶,或者给片段加个A再做克隆,克隆不长斑因素很多的啦,不过我们原来做的时候如果不是单一的条带是肯定不会往下做克隆的。
11楼2010-10-09 10:46:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xinmucong123

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+2):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-10-12 23:25:46
加大回收片段的浓度,或者换个载体,我有个4000多的刚开始用PMD-19连不上,后来把回收片段浓度加大了,换了promaga的T载体,就连上了
12楼2010-10-12 21:35:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我本兽医

铁虫 (初入文坛)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+2):taq酶? 2010-10-12 23:26:08
用TAQ酶,保证回收浓度,1:4:5连接,感受态效率不太低==OK
13楼2010-10-12 22:29:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amilie030312

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by xinmucong123 at 2010-10-12 21:35:17:
加大回收片段的浓度,或者换个载体,我有个4000多的刚开始用PMD-19连不上,后来把回收片段浓度加大了,换了promaga的T载体,就连上了

说的应该是Thermus Aquaticus DNA Ligase,就是Taq DNA连接酶。不过据我所知,Taq DNA 连接酶连接双联DNA中的单链切刻比较有效。我还是认为T4效果比较好,而且平末端和粘性末端都能连。
14楼2010-10-15 13:57:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xmasylm

铜虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
提高浓度,加polyA
15楼2010-10-16 00:22:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 我是果果 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +4 d如愿上岸 2026-03-12 6/300 2026-03-16 14:48 by 可淡不可忘
[考研] 0703化学调剂 +5 妮妮ninicgb 2026-03-15 8/400 2026-03-16 14:44 by 可淡不可忘
[考研] 0703化学调剂 ,六级已过,有科研经历 +5 曦熙兮 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:10 by 可淡不可忘
[考研] 290求调剂 +5 孔志浩 2026-03-12 10/500 2026-03-16 09:01 by 余晖&
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +3 嘉年新程 2026-03-15 3/150 2026-03-15 13:58 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧, 2026-03-12 4/200 2026-03-14 16:58 by 有只狸奴
[考研] 复试调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +5 SUICHILD 2026-03-12 5/250 2026-03-14 14:53 by jean5056
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +7 邱gl 2026-03-10 11/550 2026-03-14 12:18 by 邱gl
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +7 温乔乔乔乔 2026-03-12 14/700 2026-03-14 10:49 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +9 小木虫085600 2026-03-09 12/600 2026-03-14 01:11 by JourneyLucky
[考研] 求调剂,一志愿江南大学环境工程085701 +3 Djdjj12 2026-03-10 4/200 2026-03-14 00:31 by JourneyLucky
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 302求调剂 +6 负心者当诛 2026-03-11 6/300 2026-03-13 16:11 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕350 求调剂 +4 王金科 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:02 by ruiyingmiao
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生,2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
[考研] 0856材料与化工353分求调剂 +11 NIFFFfff 2026-03-09 11/550 2026-03-10 18:36 by suyuanhai
[考研] 一志愿:武汉理工,材料工程,英二数二 总分314 +3 2202020125 2026-03-10 4/200 2026-03-10 13:54 by xiongyaxuan
信息提示
请填处理意见