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【求助/交流】针对目标抗原的IgG型异种抗体可不可以作为细胞培养的抑制剂?悬赏金币50
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lksuccess
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[交流]
【求助/交流】针对目标抗原的IgG型异种抗体可不可以作为细胞培养的抑制剂?悬赏金币50
已有3人参与
例如某蛋白质可能在细胞内(体细胞或者生殖细胞),能否用抗此蛋白质的异种血清IgG作为抑制剂从而检测蛋白质对细胞的影响?关键是异种IgG能否进入细胞?IgG在细胞内如何与目标蛋白发生作用?用什么原理解释?先谢谢各位了! 在下面链接领金币
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2396066。
[
Last edited by lksuccess on 2010-9-14 at 01:01
]
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2010-09-14 00:52:54
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IgG与目标蛋白发生作用,你需要验证是特异性结合(可变区),还是非特异结合(恒定区如FC)
另,虽然偶有观察到抗体进入细胞内(内吞或其它?),但通常认为全分子抗体是不能自由进入胞内的,你可以试试偶联其它载体分子,或者抗体片段如单域抗体。
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2013-06-05 09:38:43
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dianaofyezi
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lksuccess(金币+1):谢谢交流 2010-09-14 15:59:41
IgG需要一定的物质携带才能进入细胞,否则就只能破坏细胞了。你可以将你研究的蛋白用突变的方法使他失活或者低含量表达,然后研究功能。或者用该蛋白的拮抗剂(如小分子物质)与之结合研究其功能。
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2010-09-14 09:03:21
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专业: 化学环境污染与健康
silicare:我认识一个老师研究这个N年了,没成功过~ 2010-09-16 11:53:11
引用回帖:
Originally posted by
dianaofyezi
at 2010-09-14 09:03:21:
IgG需要一定的物质携带才能进入细胞,否则就只能破坏细胞了。你可以将你研究的蛋白用突变的方法使他失活或者低含量表达,然后研究功能。或者用该蛋白的拮抗剂(如小分子物质)与之结合研究其功能。
因为我研究的是精子,成熟精子不能翻译表达蛋白!我现在用抗体作用后有效果,但没有合理的理论支撑。像一些免疫细胞上会有IgG受体进入胞内。而精子细胞关于这种报道甚少!
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2010-09-14 15:58:33
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dianaofyezi
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amisking(金币+3):good! 2010-09-14 22:43:19
免疫细胞上的是受体与对应的抗体结合之后才能进入胞内。
你研究的精子细胞我不是很了解。但是如果你只是想证明某种蛋白不能表达,是可以将成熟的精子细胞和未发育成熟的细胞做对比试验。例如IFA或者IHC之类的。
提个方案,希望对你 有用。
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2010-09-14 17:05:16
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