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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】RNA提的不好，基本都降解的话，逆转录后再PCR会是什么结果？
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dongfangzz

银虫 (小有名气)
电泳图上RNA基本降解，但是PCR之后出来了清晰的条带，只是比我的目的带多几十个bp（目的170，实际200多）！
奇怪吧！
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11楼2010-09-13 17:05:20
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hongyuan1016

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
同意十楼的看法。
提RNA之前一定要做好准备工作，至少有十几样东西需要准备。保证提取过程的顺利
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12楼2010-09-14 16:22:26
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hongyuan1016

铁虫 (初入文坛)
我这两天也遇到这种情况，换个Marker看看行不行
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13楼2010-09-14 16:24:22
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
需要从来~仅此而已~
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14楼2010-09-14 16:26:40
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sfxt001

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这样是没有意义的，结果就是无论你得到什么结果，你都不敢相信它，还得从新做过。
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15楼2010-09-15 15:15:07
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dongfangzz

银虫 (小有名气)
但用同样的模板，有的基因产物大小是对的
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16楼2010-09-15 23:34:48
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wmjqy

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
183660楼: Originally posted by dongfangzz at 2010-09-12 09:43:38
如果RNA提的不好，基本都降解的话，逆转录后，以cDNA为模板再PCR，跑电泳显示会是什么结果？

你是怎么确定你的RNA降解了？用什么方法确定的？
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17楼2012-05-28 23:57:44
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陈朵朵

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我提完RNA之后 大部分降解了，但是我还是接着做了一次一步法RT-PCR，结果反转录出来的DNA 还是挺亮的。后来又进行了一次普通PCR 进行的胶回收，可以看到明显的目的条带。你的是先提RNA，然后反转录得到cDNA，之后再进行PCR，跟我的一步法RT-PCR 还是有区别的。不过你可以接着做一次，万事皆有可能，也许反转录效率很高，可以得到清晰的目的条带呢~
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18楼2012-05-29 10:09:34
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bainaling

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看来真的是一切皆有可能、、、
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19楼2012-11-28 14:58:13
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風羽

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
基本降解了，最多只能逆转录出cDNA小分子序列，所以在跑电泳时候阻力很小，跑的很快会脱胶，或者不明显
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20楼2013-12-19 17:28:45
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