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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】人类基因的污染
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wdy0330

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】人类基因的污染 已有4人参与

大家好，我最近在做人类基因三倍体相关方面的检测，选择了一个人类基因内参做对照，但是在试验中很容易出现污染，就是未添加模板组仍在荧光定量PCR中可检测到扩增，所以我想问下相关实验的高手，人类基因在试验中真的是这么容易污染进扩增体系中吗？该如何避免？
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1楼 2010-09-10 13:47:27
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户
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1949stone(金币+2):有道理 2010-09-10 14:51:53
恐怕不是人的原因，更重要的是你的实验室环境，一个严格的实验室要把PCR试验区域和产物严格分离的。要知道你一大块组织上的DNA模板量也不及你PCR产物中一个微小的飞沫中模板量多。有条件的话换个实验室，换个环境再做一下试试。
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金币是赌出来的
2楼2010-09-10 14:20:02
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aga0110125

银虫 (小有名气)
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1949stone(金币+2):有道理 2010-09-10 14:52:00
除环境原因外，PCR体系中的各组分也要注意防止污染，我们就有发现TAQ被人类基因组污染的经历
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3楼2010-09-10 14:41:01
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wdy0330

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by wjswj at 2010-09-10 14:20:02:
恐怕不是人的原因，更重要的是你的实验室环境，一个严格的实验室要把PCR试验区域和产物严格分离的。要知道你一大块组织上的DNA模板量也不及你PCR产物中一个微小的飞沫中模板量多。有条件的话换个实验室，换个环境 ...

麻烦问下这种非人为污染的概率很大吗？就这么容易被污染？
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4楼2010-09-10 15:08:20
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Lee_Py

银虫 (小有名气)
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其实嘛  这个很难避免 真正想做到不污染  个人感觉 几乎是不可能的 说不定 就把空气中的什么菌的基因组给提出来了
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5楼2010-09-10 15:31:15
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Lee_Py

银虫 (小有名气)
我们实验室以前一个学生 做PCR  能把水P出条带来 服了把
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6楼2010-09-10 15:32:32
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wjswj

木虫 (正式写手)

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lstt09nk(金币+2):挺热心的~ 2010-09-13 09:23:52
引用回帖:
Originally posted by wdy0330 at 2010-09-10 15:08:20:


麻烦问下这种非人为污染的概率很大吗？就这么容易被污染？

就我的经历来看这种情况出现的几率比较大，只要不是严格分区都很容易遇到，包括细菌的，人的，都出现过。尤其是以PCR为主的实验室。即使在超净台内做也是一样，试剂全新也还是会有，可能是引物已经被污染了。PCR产物形成气溶胶后实在是很可怕的。曾经在楼道里做过PCR，虽然环境复杂，但污染消失。
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金币是赌出来的
7楼2010-09-13 08:47:54
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