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yuyan225

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】急求高手指教测黑曲霉的蛋白酶~~

我最近在做蛋白酶的过表达实验,是把两个含蛋白酶的基因的质粒转到黑曲霉里进行表达,一个为异源蛋白,一个是其同源蛋白,转化后经PCR验证出现目的条带。但发酵测酶活时酶活特别低,我认为是培养基不适宜产酶,但换了很多培养基之后酶活还是很低~~求高手指点黑曲霉产蛋白酶的适宜培养基及酶活低的解决方案~
   非常感谢大家~~
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lucylily08

新虫 (小有名气)


yuyan225(金币+1):谢谢参与
虽然不太懂蛋白,支持一下 会有结果滴!~
2楼2010-09-09 15:24:27
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

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优秀版主


yuyan225(金币+1):谢谢参与
有可能是载体问题,看看什么启动子驱动的
3楼2010-09-09 16:28:58
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道格森

新虫 (初入文坛)


yuyan225(金币+1): 谢谢参与
实验有结果了吗?我现在也在做这一块,黑曲霉转化子的基因组里扩增出目的基因了,发酵液测不到酶活。
我用国标的方法测得。
4楼2018-04-18 11:21:35
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倒霉熊的微笑

铜虫 (初入文坛)


yuyan225(金币+1): 谢谢参与
您好,我刚开始做黑曲霉的原生质体转化,对照长得很好,但是实验组一个转化子都不长,请问是什么原因呢?
5楼2019-01-07 11:32:08
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