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沧海孤泪

金虫 (著名写手)

[求助] 请教液相色谱峰积分的问题

请教一下各位，我做的是甘油的聚合，柱子是氨基柱，规格是D4.6mm×250mm;流动相:乙腈-水体系, (体积比为85 :15);柱和流动池温度皆为40℃;检测器灵敏度为3(示差折光);体积流量为1.0mL/min.
甘油聚合后的产物，溶解于乙腈-水体系中(体积比为30:70),配成1%溶液,用0.5μm有机相微孔膜过滤后进行HPLC分析.
上述条件准备好以后，有些峰拖尾，不知道如何积分？，下面请各位虫友看一下我的色谱图！


基线是应该水平呢，还是不应该呢？是否应该手动积分呢？
大峰后面那个峰应该怎么处理呢？
第二个图是手动积分后的，这样造成的误差是不是很大呢？
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1楼 2010-09-08 10:42:52
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flyfish1982

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

沧海孤泪(金币+3): 2010-09-08 20:00:46
从你的图分析，8分钟之前的色谱峰很难保证是单一物质，建议你先对流动相进行细致的调节，对水的组成稍微增加，尝试将环二和甘油峰混的杂质分离开来，否则的话即使手都积分，误差也不是在可接受的范围的，数据可能会欺骗你。
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意志总在挫折和忍耐中坚强
3楼2010-09-08 14:18:09
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音

【答案】应助回帖

沧海孤泪(金币+3, 博学EPI+1): 2010-09-08 20:00:41
基线确实不算平，但是还在可以接受的范围内，两个峰没达到基线分离的需要手动积分，环二，二聚和环状三聚需要手动，基线分离的不用了，四聚和环六就没必要了，其实这个才16min，没必要都挤在一起，放到25-30min分的应该比现在要好，或者用梯度洗脱都不会这样，第一个峰才4min多就出了，肯定不好看，6min以后出第一个峰就好多了
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Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
2楼2010-09-08 10:49:26
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