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沧海孤泪

金虫 (著名写手)

[求助] 请教液相色谱峰积分的问题

请教一下各位,我做的是甘油的聚合,柱子是氨基柱,规格是D4.6mm×250mm;流动相:乙腈-水体系, (体积比为85 :15);柱和流动池温度皆为40℃;检测器灵敏度为3(示差折光);体积流量为1.0mL/min.
甘油聚合后的产物,溶解于乙腈-水体系中(体积比为30:70),配成1%溶液,用0.5μm有机相微孔膜过滤后进行HPLC分析.
上述条件准备好以后,有些峰拖尾,不知道如何积分?,下面请各位虫友看一下我的色谱图!


基线是应该水平呢,还是不应该呢?是否应该手动积分呢?
大峰后面那个峰应该怎么处理呢?
第二个图是手动积分后的,这样造成的误差是不是很大呢?
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flyfish1982

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

沧海孤泪(金币+3): 2010-09-08 20:00:46
从你的图分析,8分钟之前的色谱峰很难保证是单一物质,建议你先对流动相进行细致的调节,对水的组成稍微增加,尝试将环二和甘油峰混的杂质分离开来,否则的话即使手都积分,误差也不是在可接受的范围的,数据可能会欺骗你。
意志总在挫折和忍耐中坚强
3楼2010-09-08 14:18:09
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音

【答案】应助回帖

沧海孤泪(金币+3, 博学EPI+1): 2010-09-08 20:00:41
基线确实不算平,但是还在可以接受的范围内,两个峰没达到基线分离的需要手动积分,环二,二聚和环状三聚需要手动,基线分离的不用了,四聚和环六就没必要了,其实这个才16min,没必要都挤在一起,放到25-30min分的应该比现在要好,或者用梯度洗脱都不会这样,第一个峰才4min多就出了,肯定不好看,6min以后出第一个峰就好多了
Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
2楼2010-09-08 10:49:26
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