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——————————最权威的细胞增值实验方法——————————
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1、请问现在有影响力的文章或大家公认的权威细胞增值检测方法是什么？ 2、BrdU实验是否可以？ 3、MTT法是不是认可的学者不多？ [ Last edited by xjxlovelxl on 2010-9-7 at 11:49 ] |
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最常用的是MTT法，现在论文也主要采用这种方法做！MTT法(3-(4, 5-二甲基噻唑-2)-2, 5-二苯基四氮唑溴盐) 原理：活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶干水的蓝紫色产物(formazan)，并沉淀在细胞中，而死细胞没有这种功能。DMSO能溶解沉积在细胞中蓝紫色结晶物，溶液颜色深浅与所含的formazan量成正比，再用酶标仪测定OD值 MTT法简单快速、准确，广泛应用于新药筛选、细胞毒性试验、肿瘤放射敏感性实验等。 操作步骤 a.100μL单细胞悬液接种于96孔板(5×104)。 b.培养24h后，加药，设六个平行样。 c.给药72h后，加入0.5mg/mL的MTT液(50μL)；继续培养4h。 d.吸出孔内培养液后，加入DMSO(200μL)，然后微孔板扳荡器上振荡10分钟。 e.酶标仪检测各孔OD值(检测波长570nm) 抑制率=(1-给药组平均OD/对照组平均OD)×100% |
4楼2010-10-28 19:19:18