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[交流]
【求助】怪问题--小柱试验分别在大柱和之后的小柱不能重复
最近在分离某药材成分,上小柱后发现有两物质在氯仿-甲醇(8:2)的第三四个馏分就洗脱出来了,而且量较大,本来想得好好的,上大柱富集更多的量,但事与愿违,同样的条件在大柱上洗脱了半天竟然一无所获;奇怪的是后来重新提取样品上小柱也没有重复出来。
问题是之前洗脱出来的两个东西究竟去哪里了?!!!
Ps:第一次上小柱时湿法拌样用的是氯仿-甲醇(2:8)本应是氯仿-甲醇(8:2),后来用氯仿-甲醇(8:2)平衡四个柱体积后上样的。
还有奇怪的是我用相对极性小的洗脱剂氯仿-甲醇(8:2)在硅胶上洗脱出来的两物质在C18柱上甲醇:水(35:65)等梯度的时候在前面出峰,如附件图。

请大家帮忙解决下。。。。 |
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