【求助/交流】细胞培养问题请教！ - 分子生物 - 综合其他

有些路你必须走，即使你不情愿！

11楼2010-08-27 14:32:47

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chunmeiyang

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Originally posted by jiarui5582 at 2010-08-27 14:32:47:
我们做的一般是加适量的胰酶消化，再终止消化，离心，去上清液，在培养！

为啥要离心啊，这样细胞不会死吗再培养的话你们要不要换到另一个培养皿或培养瓶培养啊离心完了不都聚到一起了吗

12楼2010-08-27 20:13:00

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silicare

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胰酶可以不去掉，血清就可以终止其反应

13楼2010-08-27 20:32:44

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sqhnsd

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lstt09nk(金币+1):鼓励交流~~欢迎常来~ 2010-08-28 17:00:19

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Originally posted by chunmeiyang at 2010-08-26 14:34:56:
细胞传代消化时，大家都是怎么吹打的啊？就是用枪直接吹吸得吗？我用枪吹打完，有时会有一些细胞碎片，是不是我太用力了导致细胞破裂了啊？而且有时候会吹打出很多气泡？不知道如何解决？大家给点意见吧~

直接捶打，碎片你可以通过离心去除，不过一般碎片没有那么多，也不怎么影响。如果有气泡，你可以用吸管把他洗出来，主要不要把培养基也洗出来了，你倾斜一些就可以洗出泡泡了。

14楼2010-08-27 20:49:45

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云泽紫樱

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多用滴管吹吧，用枪吹容易把细胞吹碎

“幸福”就是猫吃鱼，狗吃肉，奥特曼打小怪兽~

15楼2010-08-28 16:52:49

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lstt09nk

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Originally posted by silicare at 2010-08-27 20:32:44:
胰酶可以不去掉，血清就可以终止其反应

如果是加EDTA的胰酶的话，是要转入离心管去离心，然后去上清的~
如果是不含EDTA的胰酶，直接可以加培养液终止反应的

坚持能无数次改变人生的风景，因为只要路是对的，就不怕远~~~

16楼2010-08-28 16:59:28

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吹的时候不要把移液管中的液体打完

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17楼2010-08-29 20:31:14

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18楼2010-08-29 20:31:25

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Originally posted by chunmeiyang at 2010-08-27 13:49:19:

胰酶不用吸掉吗

胰酶浓度大时可以消化，但是加入培养基后就变小了，我们加的也只有一点点0.1 ml，能把细胞铺过来就好了，然后就轻轻吹一下，用弯头细管小心吹几下。

.心静智高,心和智达,心慈智深;高者俯看天下,仁者包容万物,深者耳顺人生,爱者笑看天下.

19楼2010-08-30 08:54:12

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zhykjxnc00

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Originally posted by zhykjxnc00 at 2010-08-30 08:54:12:

胰酶浓度大时可以消化，但是加入培养基后就变小了，我们加的也只有一点点0.1 ml，能把细胞铺过来就好了，然后就轻轻吹一下，用弯头细管小心吹几下。

再加点培液，稀释一下就好了。。。