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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】细胞培养问题请教！
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jiarui5582

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我们做的一般是加适量的胰酶消化，再终止消化，离心，去上清液，在培养！
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有些路你必须走，即使你不情愿！
11楼2010-08-27 14:32:47
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chunmeiyang

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by jiarui5582 at 2010-08-27 14:32:47:
我们做的一般是加适量的胰酶消化，再终止消化，离心，去上清液，在培养！

为啥要离心啊，这样细胞不会死吗  再培养的话  你们要不要换到另一个培养皿或培养瓶培养啊  离心完了  不都聚到一起了吗
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12楼2010-08-27 20:13:00
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
胰酶可以不去掉，血清就可以终止其反应
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13楼2010-08-27 20:32:44
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sqhnsd

金虫 (正式写手)
★
lstt09nk(金币+1):鼓励交流~~欢迎常来~ 2010-08-28 17:00:19
引用回帖:
Originally posted by chunmeiyang at 2010-08-26 14:34:56:
细胞传代消化时，大家都是怎么吹打的啊？就是用枪直接吹吸得吗？我用枪吹打完，有时会有一些细胞碎片，是不是我太用力了导致细胞破裂了啊？而且有时候会吹打出很多气泡？不知道如何解决？大家给点意见吧~

直接捶打，碎片你可以通过离心去除，不过一般碎片没有那么多，也不怎么影响。如果有气泡，你可以用吸管把他洗出来，主要不要把培养基也洗出来了，你倾斜一些就可以洗出泡泡了。
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14楼2010-08-27 20:49:45
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云泽紫樱

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
多用滴管吹吧，用枪吹容易把细胞吹碎
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“幸福”就是猫吃鱼，狗吃肉，奥特曼打小怪兽~
15楼2010-08-28 16:52:49
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lstt09nk

铁杆木虫 (职业作家)

小堂
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-08-27 20:32:44:
胰酶可以不去掉，血清就可以终止其反应

如果是加EDTA的胰酶的话，是要转入离心管去离心，然后去上清的~
如果是不含EDTA的胰酶，直接可以加培养液终止反应的
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坚持能无数次改变人生的风景，因为只要路是对的，就不怕远~~~
16楼2010-08-28 16:59:28
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fjj5d20

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
吹的时候 不要把移液管中的液体打完
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天道酬勤
17楼2010-08-29 20:31:14
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fjj5d20

金虫 (正式写手)
吹的时候 不要把移液管中的液体打完
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天道酬勤
18楼2010-08-29 20:31:25
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zhykjxnc00

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by chunmeiyang at 2010-08-27 13:49:19:

胰酶不用吸掉吗

胰酶浓度大时可以消化，但是加入培养基后就变小了，我们加的也只有一点点0.1 ml，能把细胞铺过来就好了，然后就轻轻吹一下，用弯头细管小心吹几下。
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.心静智高,心和智达,心慈智深;高者俯看天下,仁者包容万物,深者耳顺人生,爱者笑看天下.
19楼2010-08-30 08:54:12
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zhykjxnc00

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by zhykjxnc00 at 2010-08-30 08:54:12:



胰酶浓度大时可以消化，但是加入培养基后就变小了，我们加的也只有一点点0.1 ml，能把细胞铺过来就好了，然后就轻轻吹一下，用弯头细管小心吹几下。

再加点培液，稀释一下就好了。。。
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.心静智高,心和智达,心慈智深;高者俯看天下,仁者包容万物,深者耳顺人生,爱者笑看天下.
20楼2010-08-30 08:55:16
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