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linxi8579

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】luciferase assay

请问有人做过luciferase assay吗，给俺讲讲啊。非常感谢啦。
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1楼 2010-08-25 17:35:08
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看天

木虫 (知名作家)
linxi8579(金币+2): 2010-08-25 20:57:54
曾经测ATP的时候是用萤光酶和荧光素试剂盒的
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戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。
2楼2010-08-25 19:41:45
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linxi8579

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 看天 at 2010-08-25 19:41:45:
曾经测ATP的时候是用萤光酶和荧光素试剂盒的

您做过啊，那太好了啊。我是做小RNA的，想用这个技术来验证小RNA与靶基因的关系，也就是说我们测序出来的小RNA我想用这个方法来验证靶基因。具体的做法是不是就是和GFP标记差不多啊，把荧光素酶基因连到靶基因的下游如果靶基因被RNAi了，就没有荧光了。是这样吗，但是怎么还用得到试剂盒啊?期待您的指点啊。
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3楼2010-08-25 21:02:41
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看天

木虫 (知名作家)
引用回帖:
Originally posted by linxi8579 at 2010-08-25 21:02:41:

您做过啊，那太好了啊。我是做小RNA的，想用这个技术来验证小RNA与靶基因的关系，也就是说我们测序出来的小RNA我想用这个方法来验证靶基因。具体的做法是不是就是和GFP标记差不多啊，把荧光素酶基因连到靶基因的 ...

RNA不知道 我只做ATP
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戒嗔怒以养肝气，省言语以养神气，多读书以养质气，顺时令以养元气，不拘节以养大气，观天变以养灵气，莫强求规于运气。
4楼2010-08-25 22:24:35
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★ ★
lstt09nk(金币+2):热心的斑斑~ 2010-08-26 09:08:20
linxi8579(金币+3): 2010-08-27 08:50:14
引用回帖:
Originally posted by linxi8579 at 2010-08-25 21:02:41:

您做过啊，那太好了啊。我是做小RNA的，想用这个技术来验证小RNA与靶基因的关系，也就是说我们测序出来的小RNA我想用这个方法来验证靶基因。具体的做法是不是就是和GFP标记差不多啊，把荧光素酶基因连到靶基因的 ...

是RNA干扰吧

luc就是个对照，可以买promega的 pgl系列的载体，这个是luc载体，当然了荧光素酶检测的试剂盒也是买promega的，还有就是，检测这个试剂盒是需要仪器的，也是promega的，因为luc荧光和普通的化学发光是不一样的，所以仪器也是专用的~
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5楼2010-08-26 08:39:53
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linxi8579

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-08-26 08:39:53:


是RNA干扰吧

luc就是个对照，可以买promega的 pgl系列的载体，这个是luc载体，当然了荧光素酶检测的试剂盒也是买promega的，还有就是，检测这个试剂盒是需要仪器的，也是promega的，因为luc荧光和普通的化 ...

麻烦您给我讲一下原理好吗，非常感谢了！
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6楼2010-08-27 08:49:52
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linxi8579

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-08-26 08:39:53:


是RNA干扰吧

luc就是个对照，可以买promega的 pgl系列的载体，这个是luc载体，当然了荧光素酶检测的试剂盒也是买promega的，还有就是，检测这个试剂盒是需要仪器的，也是promega的，因为luc荧光和普通的化 ...

我是做RNAi机制的，然后可能用这个来验证靶基因。
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7楼2010-08-27 08:51:45
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
看天(金币+1):灰常好 2010-08-27 09:10:57
linxi8579(金币+2): 2010-08-30 17:11:45
请去查psiCHECK-2质粒的说明书，原理什么的讲得灰常清楚
检测的仪器用可以测生物发光的酶标仪都可以
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8楼2010-08-27 09:01:53
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linxi8579

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-08-27 09:01:53:
请去查psiCHECK-2质粒的说明书，原理什么的讲得灰常清楚
检测的仪器用可以测生物发光的酶标仪都可以

谢谢啦。
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9楼2010-08-30 17:11:59
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