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zhanghuifeng

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】求助CHO细胞培养基优化实验方案

我要做重组CHO细胞无血清培养基的优化实验,就是要在DMEM-F12基础培养基的基础上通过添加一些因子(比如乙醇胺,胰岛素,转铁蛋白等)来优化培养基,使细胞密度,细胞活力和重组蛋白表达量都有一定的提升,需要设计实验方案,我想请问一下应该怎么设计?
    我看了一些文献,有用到响应面分析法来设计实验的,我也想可以用这种方法吗,应该怎么样学习呢?请大家帮帮忙!
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千古龙飞地

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+1): 拿来用不难。我以前完全不懂原理,也依葫芦画瓢用来优化过培养基…… 2011-12-14 19:49:34
响应面分析还是比较好学的,可以看看网上的视频,应该三五天就能学会的,参考文献的方法,优化培养基还是比较方便的,关键就要看你优化成分是不是有效的
6楼2011-12-14 13:15:03
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chuchengliang

银虫 (小有名气)

★
amisking(金币+1):多说点嘛! 2010-08-21 22:31:13
zhanghuifeng(金币+1): 2010-08-22 09:33:59
引用回帖:
Originally posted by zhanghuifeng at 2010-08-21 19:46:22:
我要做重组CHO细胞无血清培养基的优化实验,就是要在DMEM-F12基础培养基的基础上通过添加一些因子(比如乙醇胺,胰岛素,转铁蛋白等)来优化培养基,使细胞密度,细胞活力和重组蛋白表达量都有一定的提升,需要设 ...

随便添加的什么都有可能对你的细胞的密度和蛋白的表达有提高,
不知道你是要提高多少?
2楼2010-08-21 22:02:41
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zhanghuifeng

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by chuchengliang at 2010-08-21 22:02:41:

随便添加的什么都有可能对你的细胞的密度和蛋白的表达有提高,
不知道你是要提高多少?

已经有这种细胞的SFM商业化培养基了,想要达到或者超过这种培养基,有可能吗?
3楼2010-08-22 09:35:49
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chuchengliang

银虫 (小有名气)

zhanghuifeng(金币+1): 2010-08-25 10:30:44
商业培养基并不一定就是最好的培养基,
用相应面优化固然可以,但是花费的时间是很多的,因为你要找到显著性的影响因素,这样就要设计单因子试验,如果从基础培养基着手的话,这样的工作量就非常大了,现在CHO细胞的工艺算是比较成熟了,多看点文献,最好是借鉴别人的现成的培养基进行改进好了,当然,要是时间允许的话可以从基础培养基慢慢试
4楼2010-08-24 22:09:17
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