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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物化学 » 【求助】请教关于脂质体纯化的问题
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dingwjs

银虫 (小有名气)
★
coolgongjun(金币+10):谢谢!辛苦了! 2010-09-02 08:06:02
qinhy(金币+1):多谢指教，欢迎常来药学版！ 2010-12-29 17:18:00
我做的是微量的，用离心机2000r/min转3分钟，脂质体就下来了，大点儿的柱子我不清楚，我没做过，不好意思
找了下以前的实验记录，你参考一下吧
        凝胶微型柱的制备
原理：由于凝胶中有许多小孔，体积较大的脂质体不进入小孔而从间隙中先流出，而体积较小的未包裹的药物及杂质进入小孔后流出而达到分离的目的。
制备：取Sephagex G-50适量，填入1ml塑料注射器中，此注射器事先取芯后塞入一小块棉花。将注射器放入离心机中，再2000r/min离心3min，除去过量的生理盐水，柱床高度达0.8ml刻度线位置。
        饱和微型柱
原理：由于凝胶表面上的许多位点能与脂质体膜相互作用结合，照成小量的脂质体丢失。因此用空白脂质体预先饱和柱的表面，避免由于吸附照成的脂质体丢失现象的发生。
操作：分取空白脂质体0.1ml，加到微型柱上，在2000r/min离心3min，再加入0.2ml的缓冲液洗涤微型柱。
         分离纯化脂质体
将脂质体各取0.1ml置微型柱离心分离，收集第一管，理论上极为纯化的脂质体。
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11楼2010-09-01 16:08:42
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coolgongjun

木虫 (正式写手)

请教选择凝胶的问题

引用回帖:
Originally posted by 23010402 at 2010-08-22 09:09:49:
自己装G50柱，用不了好多凝胶，也不贵的

想问一下凝胶的选择问题。我的课题主要是用聚合物来修饰脂质体，聚合物中有疏水的长链可以插到脂质体中。没有插进去的聚合物会在脂质体外部形成胶束需要除去，聚合物的分子量一般在几万到几十万，胶束粒径大约几个纳米，不知道选择什么样的凝胶好一点。文献中有报道sephadex G50/G100/G200,sepharose 2B的都有，可这些凝胶说明书上一般只写分离蛋白时的分子量范围，怎么选择？
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12楼2010-10-28 10:46:57
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c030090295

银虫 (初入文坛)
coolgongjun(金币+6): 2010-12-29 09:50:11
分子量较小的用sephedexG50，大的用Sephavose 2B
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13楼2010-12-29 09:48:46
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