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caiyupin

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 12.5
帖子: 6
在线: 2.4小时
虫号: 444864
注册: 2007-10-27
性别: GG
专业: 生科

[交流] 【求助/交流】链置换活性已有4人参与

大家好，最近看恒温扩增的文献，有很多聚合酶都有链置换的活性（stand displacement activity）,比如Bst，Phi29，exo- Klenow, 但一直没有找到文献来说链置换的原理是什么，不知道版上有没有人关注过这个问题？

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1楼 2010-08-17 10:16:30

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cexoihtydx

金虫 (正式写手)

MolEPI: 5
应助: 4 (幼儿园)
金币: 581.3
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红花: 5
帖子: 766
在线: 263.3小时
虫号: 722752
注册: 2009-03-14
性别: GG
专业: 人类遗传学

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good！学习了！ 2011-09-30 20:34:22

具有链置换活性的DNA聚合酶不具有5‘->3’的核酸外切酶活性。外侧引物结合在模板链上，在聚合酶作用下向下游延伸，遇到下游内侧引物延伸合成的双链时，因不具有5‘->3’的核酸外切酶活性，无法将内侧引物的合成链切除，只能继续在聚合酶作用下，将内侧引物的合成链置换出去，形成置换链。而具有5‘->3’的核酸外切酶活性的DNA聚合酶，遇到内侧引物的合成链时将会把内侧引物的合成链切除掉，无法形成置换链。
比如：Taq DNA 聚合酶，具有5‘->3’的核酸外切酶活性，将会出现下图的结果

而具有链置换活性的DNA聚合酶，将会置换出图中前端的合成链，形成置换。

[ Last edited by cexoihtydx on 2011-9-30 at 20:35 ]

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不放弃，日子总有阳光，追求总有希望！

2楼2011-09-30 20:23:49

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sincere32

木虫 (小有名气)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 2853.9
红花: 1
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在线: 20.6小时
虫号: 13516
注册: 2003-05-31
性别: MM
专业: 生物化学

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

引用回帖:

2楼: Originally posted by cexoihtydx at 2011-09-30 20:23:49
具有链置换活性的DNA聚合酶不具有5‘->3’的核酸外切酶活性。外侧引物结合在模板链上，在聚合酶作用下向下游延伸，遇到下游内侧引物延伸合成的双链时，因不具有5‘->3’的核酸外切酶活性，无法将内侧引物的合 ...

7年前的回复了。想问，只是没有5到3外切能力，链置换的DNA聚合酶需要DNA解链吗？或者比通常70度以上的解链温度低很多吗？比如42度

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3楼2018-06-06 13:44:08

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