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hunter3401

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】核酸如何定量 已有2人参与

在未知,所含的核酸是DNA还是RNA或者是两者都有的情况下,知道260nm的吸收之后,如何计算合算的含量?谢谢!
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ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★
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scelab(金币+1):good 2010-08-10 22:47:02
硫酸消化,定磷
2楼2010-08-10 22:18:01
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sweetbobo

银虫 (小有名气)

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励交流 2010-08-11 11:40:19
吸收光谱:具有共扼双键的嘌呤和嘧啶,故皆具有独特的紫外吸收光谱。
核酸在240-260nm的紫外波段有强烈的吸收峰。最大吸收值在260nm附近。
通过OD260/OD280 的比值可判断样品的纯度。
纯DNA的OD260/OD280 =1.8,纯RNA的OD260/OD280 =2.0。
核酸中若含杂蛋白或苯酚则比值明显降低。
对于纯核酸样品只要读出260nm的OD值,即可算出含量,
通常:1OD260 =50ug/ml(双螺旋DNA)、
1OD260 =40ug/ml(单螺旋DNA或RNA)、
1OD260 =20ug/ml(寡核苷酸)。
3楼2010-08-10 22:47:59
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