【求助】求助：液相吸光度很低怎么回事？ - 药学 - 药物化学

随和不随意，乐观不主观。

11楼2010-08-09 21:57:56

whutxd5

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Originally posted by jyx55 at 2010-08-09 14:15:08:
哪几个峰是啊？
浓度的话，要看检测限、线性范围、精密度合不合格吧

20-40分钟内出现的几个峰都是我想要的

20-40分钟内的峰，方法学考察肯定要做，我想先按照文献上的方法做好液相条件，再做液质联用，确定了物质之后再买标品进行定量

12楼2010-08-10 00:09:22

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Originally posted by doxw0323 at 2010-08-09 21:57:56:
最后两个峰还可以，可以用紫外做下谱图，看在什么波长吸光度更大，选择合适的波长，还可以调整流动相，不过改变流动相会改变出峰。

13楼2010-08-10 00:09:43

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Originally posted by drugmen at 2010-08-09 15:52:33:
请LZ说下要考察的是哪些峰？工作站应该能看到数据的吧。

14楼2010-08-10 00:09:58

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Originally posted by chenjiajiang198 at 2010-08-09 21:01:47:
LZ 你是想做图谱分析还是要确定的做一个物质啊要是做图谱分析的话你这个分离度不行的

15楼2010-08-10 00:10:17

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Originally posted by dayao at 2010-08-09 21:48:04:
是最大吸收波长下的图吗？还是浓度低了？？？
感觉好多峰没怎么分开

16楼2010-08-10 00:10:33

HPLC做得不多，不是很了解这方面的知识，我用植物叶片提取的，从叶片质量和提取液体积之比来看，浓度已经不小了，可能是物质本身含量比较少，我是根据文献上的方法，在洗脱梯度上又做了调整，可能是这些类黄酮的极性太相似的缘故，峰总是分不开，应该如何富集样品和增大分离度呢？

20-40分钟内出现的几个峰都是我想要的

20-40分钟内的峰，方法学考察肯定要做，我想先按照文献上的方法做好液相条件，再做液质联用，确定了物质之后再买标品进行定量

请大家帮忙，谢谢！！！

17楼2010-08-10 00:12:11

drugmen

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1):谢谢回帖！ 2010-08-12 01:24:31

检测器是什么检测器？紫外还是DAD的？
极性相似导致的峰分不开，那么就要考虑流动相的溶剂了，先调比例，实在不行再换试剂。跑梯度就带有改变流动相极性的意思了。
做植化会经常接触液相的。

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18楼2010-08-10 14:33:08

whutxd5

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Originally posted by drugmen at 2010-08-10 14:33:08:
检测器是什么检测器？紫外还是DAD的？
极性相似导致的峰分不开，那么就要考虑流动相的溶剂了，先调比例，实在不行再换试剂。跑梯度就带有改变流动相极性的意思了。
做植化会经常接触液相的。

样品浓度大约是20mg/ml

我用的是265nm的，但是扫描了一个范围是250-300nm的，发现270nm下各峰的吸光度大些

我想做图谱分析，不知怎样增大分离度呢？我用的是乙腈和PH4的甲酸水做梯度。

我觉得最后那两个峰像溶剂峰

是265nm下的，扫描是在250-300nm，发现在270nm的吸光度要大些，这个下次会改进的。中间的峰很密集，可我不知道怎样改善。

DAD的监测器，我是用乙腈和甲酸水做的梯度，乙腈从初始的10%到最后的100%，应该如何让调整流动相比例才能分开这些极性相似的峰呢？中间有两个好像是同分异构体的峰。

19楼2010-08-12 00:26:54