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[交流] 【求助】求助：液相吸光度很低怎么回事？已有6人参与

大家帮我看看，我做的类黄酮的HPLC，吸光度很低，不知道这样做出的各化合物的分离度和样品的浓度是否合适，谢谢大家！

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1楼2010-08-09 11:52:14

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

whutxd5

应助: (幼儿园)
在线:
虫号: 1047219

引用回帖:

Originally posted by drugmen at 2010-08-10 14:33:08:
检测器是什么检测器？紫外还是DAD的？
极性相似导致的峰分不开，那么就要考虑流动相的溶剂了，先调比例，实在不行再换试剂。跑梯度就带有改变流动相极性的意思了。
做植化会经常接触液相的。

样品浓度大约是20mg/ml

我用的是265nm的，但是扫描了一个范围是250-300nm的，发现270nm下各峰的吸光度大些

我想做图谱分析，不知怎样增大分离度呢？我用的是乙腈和PH4的甲酸水做梯度。

我觉得最后那两个峰像溶剂峰

是265nm下的，扫描是在250-300nm，发现在270nm的吸光度要大些，这个下次会改进的。中间的峰很密集，可我不知道怎样改善。

DAD的监测器，我是用乙腈和甲酸水做的梯度，乙腈从初始的10%到最后的100%，应该如何让调整流动相比例才能分开这些极性相似的峰呢？中间有两个好像是同分异构体的峰。