24小时热门版块排行榜    

查看: 2163  |  回复: 13

sqhnsd

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 皖山潜凤 at 2010-08-13 14:14:57:





看着图确实很怪异,  怎么都不到基线呢?
你为啥不用
A液: 100%水 0.1% TFA
B液: 100% 乙腈   0.1% TFA

这样的话,在乙腈达到100%的时候,一切疏水的冻洗都应该下来,如果还不回到基线,那就说 ...

电洗脱的时候,里面有200mM的glycine,在丙酮沉淀之前我还对样品进行冻干以提高蛋白浓度,增加 actone precipitation回收率。但是,当弄干之后,盐分盐浓度就很高了(200mM其实已经比较高了),高盐情况下去除SDS效果不好(文章推荐除盐)。还有,大部分蛋白在0-60%乙腈的条件下都会洗掉,90%跟100%差别不大。另外,actone precipitation可以去除大部分SDS,因此必须放到RP-HPLC之前。你说的很对,我也觉得丙酮沉淀之后的蛋白,怪怪的

[ Last edited by sqhnsd on 2010-8-13 at 15:14 ]
11楼2010-08-13 15:11:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyan20220

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主最后结果如何?我也在做蛋白,用的C18柱子,分离产量很低,也郁闷呢
12楼2013-04-22 18:42:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冰封de沉默

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
12楼: Originally posted by liyan20220 at 2013-04-22 18:42:40
楼主最后结果如何?我也在做蛋白,用的C18柱子,分离产量很低,也郁闷呢

我下载也在做蛋白,用的也是C18柱,分离效果不好,而且出来的图谱和楼主的差不多~~相当郁闷,交流一下吧~你用的什么方法做的前处理啊?
13楼2014-03-17 21:39:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

董先森灬

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by sqhnsd at 2010-08-13 15:07:10
呵呵,谢谢。我问了一下ABI的技术支持,他认为跟分子量分离效果相关的因素除了Pore size 之外,还跟固定相的C含量有关,他建议用下C4试试,好比C18不能分离蛋白一样的道理。280我用了,尽管信号很低,但是分离 ...

您好,我最近也在用rp-hplc测定蛋白,想跟您讨论一下,可以私聊吗

发自小木虫IOS客户端
14楼2018-01-22 15:04:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sqhnsd 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286求调剂 +3 lemonzzn 2026-03-16 5/250 2026-03-16 20:43 by lemonzzn
[考研] 材料与化工求调剂 +3 为学666 2026-03-16 3/150 2026-03-16 15:09 by 加号+
[基金申请] 国自科面上基金字体 +5 iwuli 2026-03-12 6/300 2026-03-16 13:13 by Kamiu_MK
[硕博家园] 深圳大学硕士招生(2026秋,传感器方向,仅录取第一志愿) +4 xujiaoszu 2026-03-11 8/400 2026-03-16 09:45 by xujiaoszu
[考研] 290求调剂 +5 孔志浩 2026-03-12 10/500 2026-03-16 09:01 by 余晖&
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化,一志愿:哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +5 SUICHILD 2026-03-12 5/250 2026-03-14 14:53 by jean5056
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 279求调剂 +3 Dizzy123@ 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:02 by JourneyLucky
[考研] 337一志愿华南理工0805材料求调剂 +7 mysdl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 22:43 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 085600英一数二总分302 前三科235 精通机器学习 一志愿哈工大 +4 林yaxin 2026-03-12 4/200 2026-03-13 22:04 by 星空星月
[考研] 285化工学硕求调剂(081700) +6 柴郡猫_ 2026-03-12 6/300 2026-03-13 20:46 by hmn_wj
[考研] 工科278分求调剂 +5 周慢热啊 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:49 by JourneyLucky
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂! +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
[考研] 420求调剂 +4 莫向外求11 2026-03-10 6/300 2026-03-12 14:41 by ruiyingmiao
[考研] 0703化学调剂 +3 三dd. 2026-03-10 3/150 2026-03-10 15:45 by peike
[硕博家园] 木虫好像不热闹了,是不是? +4 偏振片 2026-03-10 4/200 2026-03-10 09:51 by longwave
信息提示
请填处理意见