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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】为什么？
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黎亚丽

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】为什么？已有3人参与

为什么昨天配sds-PAGE胶中的浓缩胶能凝，但是今天再配就不凝了呢？10%APS今天刚配的，30%Arc-Bis储备液刚配的，Tric-hclPH6.8，郁闷！本来样品都制好了，不能跑。还有就是分离胶能凝呀。
请大家看一下我的浓缩胶的比例：dd水：              1.025   ml
                                                    30%Arc-Bis储备液     0.3ml
                                               tris-hcl缓冲液                     0.65（0.5MPH6.8）
                           10%     SDS                      0.02ML

                           10%APS                             0.020ml
                                             TEMED                                 0.01ml

请大家给点建议。谢谢！
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1楼2010-08-06 20:10:28
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gagalady

新虫 (正式写手)

解决

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
Tris-HCl  的浓度是不是不对呀  我一直用的是1.5M  的 （pH8.8）对于分离胶
浓缩胶是1M（pH6.8）
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2楼2010-08-06 20:24:25
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黎亚丽

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gagalady at 2010-08-06 20:24:25:
Tris-HCl  的浓度是不是不对呀  我一直用的是1.5M  的 （pH8.8）对于分离胶
浓缩胶是1M（pH6.8）

要是你用1.5我用0.5，总体积一样的话，Tris-HCl  我加你的三倍不就行了
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3楼2010-08-06 21:08:09
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
凝不凝跟tris也不相关啊，肯定还是新配的APS有问题
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4楼2010-08-06 22:24:25
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黎亚丽

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-08-06 22:24:25:
凝不凝跟tris也不相关啊，肯定还是新配的APS有问题

那有没有可能是TEMED有问题呢？
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5楼2010-08-07 09:02:56
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gagalady

新虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 黎亚丽 at 2010-08-06 21:08:09:

要是你用1.5我用0.5，总体积一样的话，Tris-HCl  我加你的三倍不就行了

是按宝生物书上的比例配的么
对于终体积是2ml的浓缩胶来说
宝生物比例是这样配的
水           1.4ml
30%Acry       0.33ml
1MTris-HCl      0.25ml
10%SDS       0.02ml
10%APS       0.02ml
TEMED         0.002ml
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6楼2010-08-07 10:13:48
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黎亚丽

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gagalady at 2010-08-07 10:13:48:

是按宝生物书上的比例配的么
对于终体积是2ml的浓缩胶来说
宝生物比例是这样配的
水           1.4ml
30%Acry       0.33ml
1MTris-HCl      0.25ml
10%SDS       0.02ml
10%APS       0.02ml
TEMED    ...

是按着这个配的，没凝。是我试剂出问题了？
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7楼2010-08-07 10:57:35
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黎亚丽

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gagalady at 2010-08-07 10:13:48:

是按宝生物书上的比例配的么
对于终体积是2ml的浓缩胶来说
宝生物比例是这样配的
水           1.4ml
30%Acry       0.33ml
1MTris-HCl      0.25ml
10%SDS       0.02ml
10%APS       0.02ml
TEMED    ...

是我的30%Acry       出问题了。谢谢！
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8楼2010-08-07 15:26:35
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黎亚丽

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-08-06 22:24:25:
凝不凝跟tris也不相关啊，肯定还是新配的APS有问题

是我的30%Acry 出问题了！谢谢提建议！
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9楼2010-08-07 15:27:17
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